厌氧亚硫酸盐还原菌检测
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发布时间:2025-07-19 19:11:44 更新时间:2025-07-18 19:11:45
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作者:中科光析科学技术研究所检测中心
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厌氧亚硫酸盐还原菌(ASRB)是一类能在无氧条件下将亚硫酸盐还原为硫化物的特殊微生物群,主要包括梭菌属(如产气荚膜梭菌、肉毒梭菌等)。这类细菌在食品腐败、罐头变质、医疗感染及环境污染中起关键作用,其代谢产生的硫化氢不仅导致产品异味和腐蚀,还可能危害人体健康。因此,对食品、药品、水质及工业产品中的ASRB进行精准检测,是保障质量安全、预防生物污染的核心环节。通过系统化的检测流程,可有效评估产品灭菌效果、追溯污染源头,并为风险控制提供科学依据。
ASRB检测主要聚焦于以下关键指标:
1. 菌落总数定量:测定样品中可培养的ASRB活菌数量;
2. 菌种鉴定:区分梭菌属中的特定致病菌(如产气荚膜梭菌);
3. 代谢产物分析:检测硫化氢生成量及亚硫酸盐还原速率;
4. 耐热性评估:针对芽孢存活率进行检测,评估灭菌工艺有效性。
检测过程需依赖专业设备保障准确性:
1. 厌氧培养箱:维持严格无氧环境(氧浓度<1%),确保菌体正常生长;
2. 全自动菌落计数仪:快速统计亚硫酸盐铁琼脂平板上的黑色菌落;
3. PCR扩增仪:用于16S rRNA基因测序,辅助菌种分子鉴定;
4. 硫化氢检测管:定量分析代谢气体产物;
5. 灭菌锅与生物安全柜:保障无菌操作及实验人员安全。
主流方法结合培养学与分子生物学技术:
1. 标准平板计数法:将样品接种于亚硫酸盐铁琼脂(如SPS agar),37℃厌氧培养48小时后,计数黑色菌落(FeS沉淀);
2. MPN法:通过硫乙醇酸盐流体培养基三级稀释,根据硫化氢生成判定最大可能菌数;
3. 分子检测法:提取DNA后,利用特异性引物(如针对sul还原酶基因)进行实时荧光PCR,实现快速定量;
4. 芽孢活化法:80℃热处理10分钟杀灭营养体,再培养计数耐热芽孢。
检测流程严格遵循国际及国家规范:
1. ISO 15213:2003:食品微生物学-厌氧亚硫酸盐还原菌计数水平方法;
2. GB 4789.13-2012:中国食品安全国家标准 食品微生物学检验 产气荚膜梭菌检验;
3. USP <62>:美国药典非无菌产品微生物检查-梭菌检测指南;
4. APHA 9260F:水质标准中亚硫酸盐还原菌检测方法。所有标准均要求空白对照、阳性对照(如产气荚膜梭菌ATCC 13124)及重复实验的质量控制。
证书编号:241520345370
证书编号:CNAS L22006
证书编号:ISO9001-2024001
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