您现在的位置：首页 > 检测项目 > 其他检测

土霉素、四环素、金霉素（总量）检测

1对1客服专属服务，免费制定检测方案，15分钟极速响应

可选形式：电子报告纸质报告

可选语言：中文报告英文报告

发布时间：2025-07-21 07:30:53 更新时间：2025-07-20 07:30:53

点击：0

作者：中科光析科学技术研究所检测中心

土霉素、四环素、金霉素（总量）检测概述

土霉素（Oxytetracycline）、四环素（Tetracycline）和金霉素（Chlortetracycline）是广泛应用于畜禽养殖和水产养殖中的广谱抗生素，用于预防和治疗细菌性疾病。然而，其不合理使用可能导致药物在动物源性食品（如肉类、蛋类、奶类、蜂蜜、水产品）及环境中残留，通过食物链进入人体，引发过敏反应、肠道菌群失调、细菌耐药性增强等健康风险，甚至影响生态环境。因此，建立高效、准确、灵敏的检测方法，对食品、饲料、环境样品中土霉素、四环素、金霉素的总量进行监控，是保障食品安全、保护消费者健康、规范养殖业用药的重要技术支撑。

检测项目

本检测项目的核心目标是定量测定样品中土霉素（OTC）、四环素（TC）和金霉素（CTC）三种四环素类抗生素的残留总量。根据实际监管和风险评估需求，检测项目通常包括：

1. 定性分析： 确认样品中是否存在土霉素、四环素、金霉素或其代谢物。
2. 定量分析： 精确测定土霉素、四环素、金霉素各自的具体残留量（通常以µg/kg或µg/L表示）。
3. 总量检测： 计算并报告土霉素、四环素、金霉素三者残留量的总和（∑OTC+TC+CTC），作为总体残留水平评估的依据。部分法规标准直接对四环素类药物残留总量设定限量。

主要检测仪器

准确测定土霉素、四环素、金霉素总量需要依赖精密的实验室仪器设备，主要包括：

1. 液相色谱-串联质谱仪 (LC-MS/MS)： 是目前最主流、最权威的检测设备。液相色谱（LC）高效分离三种化合物及其可能的异构体或降解产物，串联质谱（MS/MS）通过多重反应监测模式（MRM）实现高选择性和高灵敏度（可达ppb甚至ppt级）的定性与定量分析。
2. 高效液相色谱仪配紫外/荧光检测器 (HPLC-UV/FLD)： 成本相对较低，操作较简便。利用四环素类化合物在特定波长下的紫外吸收（通常在270nm或360nm附近）或衍生化后的荧光特性进行检测。但其选择性和灵敏度通常低于LC-MS/MS，易受基质干扰，适用于浓度较高或基质相对简单的样品。
3. 固相萃取装置 (SPE)： 用于样品的净化和富集。常用C18、HLB（亲水亲脂平衡）等类型的SPE小柱去除样品基质中的脂肪、蛋白质、色素等干扰物质，提高检测的准确度和灵敏度。
4. 高速离心机： 用于样品的初步分离和沉淀。
5. 氮吹仪/旋蒸仪： 用于浓缩提取液。
6. pH计： 用于调节提取液pH值，优化提取效率（四环素类在特定pH下稳定性较好）。
7. 分析天平： 精确称量样品和标准品。

检测方法

检测过程通常包括样品前处理和仪器分析两大步骤：

一、样品前处理：
1. 提取： 将代表性样品（如均质后的肉类、研磨后的饲料、过滤后的水样等）用合适的提取溶剂（常用McIlvaine缓冲液、EDTA-Mcllvaine缓冲液、酸化乙腈、酸化甲醇等）进行振荡或均质提取。缓冲液中的螯合剂（如EDTA）能有效络合样品中的金属离子，减少其与四环素类药物的结合，提高提取效率。
2. 净化： 粗提液通常含有大量干扰物质。通过高速离心去除沉淀后，上清液经固相萃取（SPE）柱进行净化富集。选择合适的淋洗液和洗脱液，使目标化合物被保留并洗脱下来，而干扰物被去除。
3. 浓缩与复溶： 洗脱液经氮气吹干或温和旋转蒸发浓缩后，用初始流动相或特定溶剂复溶，定容，准备上机分析。
4. 过滤： 上机前样品溶液需经微孔滤膜过滤，去除颗粒物。

二、仪器分析：
1. LC分离： 使用反相色谱柱（如C18柱），以甲醇/乙腈-水（通常含甲酸/乙酸或缓冲盐）为流动相进行梯度洗脱，实现土霉素、四环素、金霉素的良好分离。
2. MS/MS检测 (针对LC-MS/MS)： 采用电喷雾离子源（ESI），在正离子模式下使目标化合物电离成[M+H]+母离子。设定特定的母离子-子离子对（MRM通道），监测其特异性碎片离子，实现高选择性的定性和定量。
3. UV/FLD检测 (针对HPLC-UV/FLD)： 在特定波长下（如UV在355nm或365nm，FLD需衍生化后检测）测定色谱峰的吸光度或荧光强度，与标准品对比进行定量。
4. 定量方法： 主要采用外标法或内标法（常用氘代同位素内标，如d6-土霉素等）。根据各目标物的标准曲线计算其浓度，最后加和计算总量。

检测标准

土霉素、四环素、金霉素（总量）的检测需遵循权威机构发布的标准方法，以确保结果的准确性、可比性和法律效力。国内外主要标准包括：

1. 中国国家标准 (GB):
* GB 31658.6-2021 《食品安全国家标准动物性食品中四环素类药物残留量的测定液相色谱-串联质谱法》：规定了动物肌肉、内脏、水产品、牛奶、鸡蛋等中多种四环素类药物（包括OTC、TC、CTC）残留量的LC-MS/MS检测方法，是目前国内最常用的强制性标准。
* GB/T 21317-2007 《动物源性食品中四环素类兽药残留量检测方法液相色谱-质谱/质谱法与高效液相色谱法》：虽然较老，但仍被部分引用，包含LC-MS/MS和HPLC两种方法。
* GB 13078-2017 《饲料卫生标准》：规定了饲料中金霉素、土霉素等药物的限量要求（以单个或总量计），其检测方法通常参照上述食品标准或农业行业标准。
2. 农业行业标准 (NY):
* NY/T 1033-2006 《饲料中革兰氏阳性菌的测定微生物学方法》：虽然主要测微生物，但有附录规定了饲料中金霉素、土霉素的HPLC检测方法（参考方法）。更常用的是参照GB标准或更新的方法。
3. 出入境检验检疫行业标准 (SN):
* 如SN/T 000X系列（具体编号需查最新）常包含出口动物源性食品中四环素类药物的检测方法（通常与国标类似或采用国际标准）。
4. 国际标准：
* 欧盟指令 (EU)： 如Commission Decision 2002/657/EC关于分析方法性能准则，以及后续修订指令中规定的LC-MS/MS方法。欧盟对不同动物组织中的四环素类总量（OTC+TC+CTC）有明确限量（MRL）。
* 美国食品药品监督管理局 (FDA)： 有相关的分析方法手册（如Chemistry Laboratory Guidebook），包含HPLC和LC-MS/MS方法。
* 国际标准化组织 (ISO)： 如ISO 13969:2009 Milk and milk products - Guidelines for a standardized description of microbial inhibitor tests（涉及抗生素检测）。更具体的四环素类检测标准可参考各国药典或AOAC方法。