心肌组织特异性过表达cTnIR145G转基因小鼠模型

C57BL/6J

扩增并经测序比对正确的cTnI^R145G突变片段插入α-MHC启动子下游构建心脏特异表达cTnI^R145G表达载体。用显微注射法将线性化的转基因载体注射到C57BL/6J小鼠的受精卵中，用ICR小鼠作假孕受体，制备转基因小鼠。PCR法鉴定小鼠基因型，Western Blot分析cTnI^R145G突变蛋白的表达情况（图1）。

图1. cTnI^R145G转基因小鼠模型的建立及鉴定

注：将cTnI^R145G突变基因片段插入α-MHC心脏组织特异性启动子下游构建转基因表达载体（A）. PCR法鉴定小鼠基因型（B）, M: 分子量标记; 1: 阳性对照; 2: 阴性对照; 3: 空白对照;  5,8: cTnI^R145G阳性转基因小鼠; 4,6,7: 阴性转基因小鼠. Western Blot分析cTnI^R145G突变蛋白表达（C）, WT: 同龄阴性对照小鼠; F₀28, 24, 4, 45: 首建鼠28,24,4,45号; GAPDH: 内参，灰度扫描定量分析蛋白表达情况（D）.

 

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