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血小板NHE1基因条件性敲除小鼠模型项目报价？ 解决方案？ 检测周期？ 样品要求？(不接受个人委托) |
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发布时间：2023-02-22 16:10:33
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| 资源中文名称 | 血小板NHE1基因条件性敲除小鼠模型 | ||||||||||||||||||||||
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| 资源英文名称 | Platelet Specific NHE1 Knock Out Mouse Model | ||||||||||||||||||||||
| 疾病概述 | 高血压是一种由环境因素、遗传因素和行为因素相互作用产生的复杂心血管症状，其中高盐摄入是最重要的环境因素之一。我国目前高血压患者已有2亿多人，其中盐敏感性高血压患者约占总患者的50%。所谓血压的盐敏感性是指相对高盐摄入所引起的血压升高，且往往伴随动脉粥样硬化、脑卒中、慢性肾病等更严重的靶器官损伤。目前全球约有62%的卒中事件和49%的心血管事件是由高血压直接引起的。盐敏感高血压病理机制复杂，动脉血管收缩及肾脏钠水代谢潴留被认为是主要发病机制之一。 我国目前抗高血压药物也主要通过舒张血管和利尿等方法降低血压，但遗憾的是药物治疗的患者仍有近半数没能有效控制血压，更缺乏对靶器官损伤及相关并发症的有效控制。 | ||||||||||||||||||||||
| 实验动物背景信息 | C57BL/6小鼠 |
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| 模型制作方法 | 1、模型设计原理： GRNA介导Cas9蛋白剪切目标外显子两端的内含子DNA，同时提供同源模板Donor，基因组两端通过同源重组修复方式进行DNA修复，在特定外显子两端插入FloxP。 NHE1-FloxP小鼠与组织特异性表达Cre小鼠交配，从而实现NHE1基因条件性敲除的目的。实验采用最新的spCas91.1进行注射，减少了基因组中的off-Target。
2、动物模型制备 2.1 NHE1floxp/flox小鼠鉴定PCR结果分析
2.2 NHE1flox/flox, Plt Cre小鼠测序结果分析 经鉴定1#和4#为NHE1flox/flox, Plt Cre 条件性敲除小鼠。
3. 标本采集及处理 条件性敲除小鼠2月龄后，称体重，麻醉后腹主动脉采血至死亡，室温静置2h后于4℃ 3000r离心10分钟提取血清，-80℃冰箱冻存。取心脏、主动脉做石蜡切片，10%中性福尔马林中固定，30%蔗糖脱水，冰冻切片包埋剂包埋并切片；进行免疫组化及免疫荧光检测，其余血管组织液氮冷冻-80℃保存，提取蛋白进行免疫印迹检测。 |
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| 动物模型的评价与验证 | 1.该模型的评价方法： 包括以整体实验为主，涵盖大体、影像、生理生化和组织切片电镜超微结构检测等技术方法。 2.评价主要指标包括： 血常规（总白细胞，血小板）；病理指标（心肌细胞水肿，肾小球）；流式指标（血小板NHE1表达及血小板P-selectin 的表达）；超微结构指标(巨核细胞中血小板的生成） | ||||||||||||||||||||||
| 保存方式 | 冷冻精子 | ||||||||||||||||||||||
| 更多相关 | 动物模型制备 |
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