结直肠癌小鼠自发性模型

APC^Min/+小鼠发病机制是突变的基因产物,截短APC蛋白导致肠道上皮细胞胞质β-catenin蛋白的积累而后使其入核与TCF4/LEF转录因子结合启动下游基因CyclinD 1等原癌基因的活化，但是其腺瘤发生、发展规律和其他生物学特性尚未探索清楚。

　　包括实验材料（实验动物、试剂、仪器）、实验环境、细胞培养/载体构建//蛋白表达/病原培养鉴定方法、实验操作规程、动物处理伦理等内容。

　　APC^Min/+小鼠，C57BL/6J小鼠，体重秤，清洁级动物房，手术剪，耳标，IVC笼盒，Co60照射的高脂饲料，PBND，蛋白酶K, promega GO TAQ Green Master Mix, takara 100bp DNA ladder, TBE缓冲液，亚甲蓝，小鼠抗人β-catenin单克隆抗体(BD Trans-ductionLaboratorie,Cat,610154),小鼠抗人cyclinD 1(SantaCruz,Cat,sc-8396);二抗为过氧化辣根酶标记山羊抗小鼠IgG, DAB显色液，苏木精染液，显微镜，凝胶成像仪，甘油三酯试剂盒及总胆固醇试剂盒等。

　　实验操作规程： APCMin/+雄性成年小鼠和C57雌性成年小鼠以1∶2的比例杂交，三个月后，其F1代中既有APCMin/+小鼠（腺瘤表型），又有C 57小鼠，进行全同胞兄妹交配，扩大种群。使用PCR方法对新生小鼠进行剪尾提取基因签定。小鼠在正常饲养时或者高脂饲料饲养时均会出现肠道肿瘤，但是肿瘤数量，体积随着饲养年龄增长而具有明显差异。