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结直肠癌小鼠自发性模型

发布时间:2025-07-25 08:49:03·浏览:72 次

检测周期 7-15 个工作日 加急可与工程师沟通
检测资质 旗下实验室 CMA CNAS 具有法律效力,可查验
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资源中文名称 结直肠癌小鼠自发性模型
资源英文名称 Mouse model for spontaneous colorectal cancer
疾病概述 家族性腺瘤性息肉病(Familial Adenomatous Polyposis,FAP)是结直肠癌发生的癌前病变,患者结直肠部位多发成百上千个腺瘤性息肉,抑癌基因APC的突变是结直肠肿瘤的起始因素。Dove实验室于1990年建立了C57BL/6J-APCmin/+小鼠品系,是在小鼠同源APC基因第850位点发生无义突变,造成其肠道多发腺瘤,被认为是一种良好的FAP小鼠模型。
实验动物背景信息

APCMin/+小鼠发病机制是突变的基因产物,截短APC蛋白导致肠道上皮细胞胞质β-catenin蛋白的积累而后使其入核与TCF4/LEF转录因子结合启动下游基因CyclinD 1等原癌基因的活化,但是其腺瘤发生、发展规律和其他生物学特性尚未探索清楚。

模型制作方法

  包括实验材料(实验动物、试剂、仪器)、实验环境、细胞培养/载体构建//蛋白表达/病原培养鉴定方法实验操作规程、动物处理伦理等内容。

  APCMin/+小鼠,C57BL/6J小鼠,体重秤,清洁级动物房,手术剪,耳标,IVC笼盒,Co60照射的高脂饲料,PBND,蛋白酶K, promega GO TAQ Green Master Mix, takara 100bp DNA ladder, TBE缓冲液,亚甲蓝,小鼠抗人β-catenin单克隆抗体(BD Trans-ductionLaboratorie,Cat,610154),小鼠抗人cyclinD 1(SantaCruz,Cat,sc-8396);二抗为过氧化辣根酶标记山羊抗小鼠IgG, DAB显色液,苏木精染液,显微镜,凝胶成像仪,甘油三酯试剂盒及总胆固醇试剂盒等。

  实验操作规程: APCMin/+雄性成年小鼠和C57雌性成年小鼠以1∶2的比例杂交,三个月后,其F1代中既有APCMin/+小鼠(腺瘤表型),又有C 57小鼠,进行全同胞兄妹交配,扩大种群。使用PCR方法对新生小鼠进行剪尾提取基因签定。小鼠在正常饲养时或者高脂饲料饲养时均会出现肠道肿瘤,但是肿瘤数量,体积随着饲养年龄增长而具有明显差异。

动物模型的评价与验证 该模型使用HE方法对APC min小鼠的小肠大肠部位进行病理评估,确认小鼠在小肠和大肠部位可以形成腺瘤,比较不同周龄小鼠的腺瘤数目和大小,发现腺瘤的发生发展规律。通过免疫组织化学染色方法确定β-catenin的表达量变化,进而助于阐明其发病机制。通过检测24周龄小鼠的红细胞数及血红蛋白、总胆固醇及甘油三酯含量,发现随着腺瘤数目和体积的增大对小鼠的影响。
保存方式 活体繁殖
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