Prkra小耳小鼠动物模型

Prkra小耳小鼠(B6.Cg-Prkralear)

1. Prkra小耳小鼠繁殖

小鼠饲养条件是按照普通常规鼠笼饲养,每个笼不超过5只小鼠。繁殖方式：用同窝的1只雄性和1只雌性交配获得杂合小鼠，饲养到可以生育的成年鼠后,然后杂合与杂合再交配，得到没有表型的杂合雌、雄小鼠。

2. Prkra 小耳小鼠的基因点突变检测

DNA 测序:设计引物进行Sanger法测序，应用试剂盒法裂解鼠尾提取DNA，洗脱出的DNA 于-20 ℃ 保存。通过引物3 在线平台( http:/ /primer3.ut.ee/ )设计候选变异引物，Prkra 正向引物为TTCAGTAGCGAGCCAGCAC,反向引物为ACAACTGTCCGCTCTGTCG。聚合酶链式反应(PCR)反应体系:金牌Mix(green)27 μl，正向引物1 μl,反向引物1 μl，模板DNA 1 μl。

Prkra 小耳小鼠野生型(上)、杂合型(中)和纯合型(下)的测序峰图，突变位点为在2 号染色体76、643、218 bp(GRCm38)上的G向A的突变,该突变位点位于第3 外显子之后。