滴鼻感染MERSCoV小鼠模型
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发布时间:2024-05-21 08:15:32 更新时间:2024-10-29 18:09:20
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资源中文名称 | 滴鼻感染MERS-CoV小鼠模型 |
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资源英文名称 | |
疾病概述 | 2012 年6 月埃及病毒学家Zaki 从沙特一位患有急性肺炎并伴发急性肾衰竭的男性患者中分离到了一株冠状病毒。随后他把病毒样本送到了荷兰鹿特丹伊拉斯姆斯大学医学中心(Erasmus Medical Center),Ron Fouchier 教授最终证实的确是一种以前没有见过的冠状病毒,命名为 HCoV-EMC,是一种不同于SARS 冠状病毒(SARS-CoV)的新型冠状病。 随后英国的科学家也确认了一名来本国就医的卡塔尔患者也感染了这种新型冠状病毒,症状亦是严重呼吸综合征,将该病毒命名为人冠状病毒-England 1( human coronavirus England 1)。后续经证实两病例感染的病毒为同一病毒,序列比对有99.5%的相似性。 2012 年9 月23 日,世界卫生组织发布公告,确认有2 名患者感染了新型冠状病毒,两人临床表现为急性呼吸道感染,并伴有急性肾衰竭。此后几个月该病毒在中东地区接连出现,并出现了小群体传播事件。另外一些欧洲、美洲、非洲国家也出现来自中东的输入病例,分离的毒株也越来越多,并各自命名,比如 human betacoronavirus 2CJordan-N3、human betacoronavirus 2c England-Qatar 等。为统一新型冠状病毒名称,方便新型冠状病毒感染病例的通报,2013 年5月国际病毒分类委员会冠状病毒研究小组将此新型冠状病毒命名为中东呼吸综合征冠状病毒(Middle East respiratory syndrome coronavirus, MERS-CoV)。 |
实验动物背景信息 |
MERS感染的恒河猴、狨猴动物模型成本较高、操作复杂,制约其在实验中大规模使用。建立一个经济实用的小动物模型作为灵长类模型的有益补充非常必要。BALB/c小鼠由于其良好的性能(遗传背景均一、个体差异小等优点)已被广泛应用于科学研究。然而BALB/c小鼠缺乏MERS-CoV的受体DPP4( 亦称CD26),自然情况下是不能被感染的。 利用不同剂量DPP4转导SPF级雌性BALB /c小鼠后建立MERS-CoV感染的动物模型。 |
模型制作方法 |
MERS-CoV (hCoV-EMC,GenBank: MH454272.1)由荷兰伊拉斯姆斯大学医学中心Ron Fouchier 教授馈赠。Ad5-DPP4 由美国爱荷华大学微生物与儿科学教研室赵金存教授馈赠。 DPP4 转导组小鼠在MERS-CoV 攻毒前,滴鼻转导Ad5-DPP4。高剂量DPP4 转导组转导剂量为2.5×108 PFU/50μl/只,低剂量DPP4 转导组转导剂量为0.5×108 PFU/50μl/只,PBS 对照组鼻腔滴入50μl PBS。DPP4 转导处理后5 天,进行MERS-CoV 滴鼻攻毒,攻毒剂量为5×105TCID50/50μl/只。观测临床症状和死亡情况。动物安乐死后,取肺组织制备病理标本,进行HE染色和免疫组化染色。剩余3只进行肺灌洗,用于病毒滴度和病毒载量测定。感染后14天,取血,分离血清用于IgG抗体和中和抗体检测。 |
动物模型的评价与验证 | |
保存方式 | |
更多相关 | 动物模型制备 |
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