TBX6相关先天性脊柱侧凸小鼠模型

FVB/NJ品系基因敲除小鼠。

我们采用CRISPR-Cas9技术编辑小鼠基因组。表 1中显示了小鼠基因组中指导RNA的靶标。我们混合了向导RNA和Cas9 mRNA（每个RNA 10 ng /μl），注射到FVB / NJ品系小鼠的合子（每次注射编辑200个细胞）。取得F0小鼠后，与野生型FVB / NJ小鼠杂交以获得后代。我们使用来自脚趾的基因组DNA，通过PCR和Sanger测序对小鼠进行基因分型。 用于扩增和测序的PCR引物在表 2中显示。

 

表 1. 小鼠基因组中单向导RNA（sgRNA）的靶序列。

Note: Sequences of sgRNA targets are underlined and the protospacer adjacent motif (PAM)sequences are shown in red.

表 2. 小鼠Tbx6基因分型的引物。