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携带A53T突变人α突触核蛋白转基因PD大鼠模型

发布时间:2025-07-25 08:49:03·浏览:42 次

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资源中文名称 携带A53T突变人α突触核蛋白转基因PD大鼠模型
资源英文名称
疾病概述 帕金森病(Parkinson's disease,PD)是最常见的慢性神经系统退行性病变之一, 其主要症状是运动功能的改变,如运动过缓、静止震颤、步态畸形和姿势不稳等病变,最后导致运动能力丧失。流行病学调查显示,随着年龄增长PD患病率逐渐增高,55岁以上的人群中,帕金森病的患病率超过1%,65岁以上约为2%,是威胁老年社会人类健康的重大疾病。
实验动物背景信息

携带A53T突变人α突触核蛋白转基因帕金森病大鼠模型。

背景品系为SD(Sprague Dawley, SD)大鼠 ,为大鼠(rat;rattus norregicus)的一个品系,属于动物界、脊索动物门、脊椎动物亚门、哺乳纲、啮齿目、鼠科、大家鼠属(Genus Rattus)、大家鼠种(Species rattus norvegicus)的动物,1925年,美国斯泼累格•多雷(Sprague Dawley)农场用Wistar大鼠培育而成。

模型制作方法

将人类α–syn A53T突变基因插入到脑组织特异启动子PDGF的下游,构建α –syn A53T表达载体。用显微注射法将线性化的转基因载体注射到SD大鼠的受精卵中,用Wistar大鼠作假孕受体,制备转基因大鼠。转基因大鼠在出生7 d,用碱裂解法提取基因组DNA。PCR法鉴定转基因首建鼠及其子代基因型。Western blot检测转基因大鼠脑组织中人α –synuclein蛋白的表达。(图1)

图1 α –synA53T转基因大鼠的建立

a. PDGF-α –syn A53T表达载体的构建

b. α –syn A53T转基因阳性鼠PCR检测。M,DL2000 DNA marker;泳道1-5、8、10-11、13为阴性;泳道6、7、9、12分别为1、8、10、36号阳性首建鼠。

c. western blot 检测转基因首建鼠脑组织中α –synuclein蛋白的表达。WT,同窝阴性对照鼠;36#、1#、8#为阳性首建鼠。GAPDH 为加样一致性对照。

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