人胰腺癌细胞PANC1绿色荧光标记肿瘤模型(PANC1eGFP)模型项目报价? 解决方案? 检测周期? 样品要求?(不接受个人委托) |
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资源中文名称 | 人胰腺癌细胞PANC-1绿色荧光标记肿瘤模型 (PANC-1-eGFP) |
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资源英文名称 | |
疾病概述 | 胰腺癌(pancreatic cancer)是一种恶性程度很高,诊断和治疗都很困难的消化道恶性肿瘤,约90%为起源于腺管上皮的导管腺癌。胰腺癌临床表现取决于癌的部位、病程早晚、有无转移以及邻近器官累及的情况。其临床特点是整个病程短、病情发展快和迅速恶化。最多见的是上腹部饱胀不适、疼痛。虽然有自觉痛,但并不是所有病人都有压痛,如果有压痛则和自觉痛的部位是一致的。其它表现有黄疸、食欲不振消化道症状、消瘦乏力、腹部包块、腹水、症状性糖尿病、血栓性静脉炎等及其它。 |
实验动物背景信息 | 人胰腺癌细胞PANC-1来自ATCC,呈多角形、上皮样贴壁生长。该细胞株源自于胰腺癌导管细胞,其倍增时间为52小时。染色体研究表明,该细胞染色体众数为63,包括3个独特标记的染色体和1个小环状染色体。该细胞的生长可被1 unit/ml的左旋天冬酰胺酶抑制;能在软琼脂上生长;能在裸鼠上成瘤。 裸鼠无胸腺裸鼠(Nude Mouse,简称裸鼠),先天性胸腺缺陷的突变小鼠,是由于第Ⅶ连锁群(Linkage group)内裸体位点的等位基因发生纯合而形成的突变小鼠新品种。裸鼠(纯合子nu/nu突变鼠)主要表现为无毛(但可看到一种细毛组织学证明有被毛滤泡)以及缺乏正常胸腺。杂合子小鼠(nn/+)各方面表现都正常。 |
模型制作方法 | 1.表达载体构建:构建chicken β-actin-GFP-NEO载体。CAG启动子由巨细胞病毒(the cytomegalovirus,CMV)早期增强子(early enhancer element)和鸡β-肌动蛋白(chicken beta-actin)启动子组成,用于驱动基因在哺乳动物载体的高水平表达。 2. PANC-1-eGFP荧光细胞系的获得:采用脂质体2000转染PANC-1细胞,转染后24 h,用含有G418的培养液筛选细胞三周,获得稳定表达GFP的细胞株,选择其中高表达的克隆株扩大培养。 3. 肿瘤细胞的植入及活体荧光成像:收集处于生长对数期的转染细胞,稀释至5×106/mL。取BALB/CA- nu裸鼠进行皮下接种,1×106个细胞/只。分别在接种的第7、14、21和28天四个时间点观察肿瘤的生长及转移情况情况。观察前每只小鼠腹腔注射荧光素底物(1.5mg/10 g),饱和三溴乙醇(0.18 mL/10 g)麻醉后放入活体荧光影像系统摄像,Slide Book 4.0软件进行分析。 |
动物模型的评价与验证 | |
保存方式 | 液氮冻存 |
更多相关 | 动物模型制备 |
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