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人胰腺癌细胞SW1990荧光素酶标记肿瘤模型

发布时间:2025-07-25 08:49:03·浏览:34 次

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资源中文名称 人胰腺癌细胞SW1990荧光素酶标记肿瘤模型
资源英文名称 SW1990-LUC
疾病概述 胰腺癌(pancreatic cancer)临床表现取决于癌的部位、病程早晚、有无转移以及邻近器官累及的情况。其临床特点是整个病程短、病情发展快和迅速恶化。最多见的是上腹部饱胀不适、疼痛。虽然有自觉痛,但并不是所有病人都有压痛,如果有压痛则和自觉痛的部位是一致的。其它表现有黄疸、食欲不振消化道症状、消瘦乏力、腹部包块、腹水、症状性糖尿病、血栓性静脉炎等及其它。 胰腺癌的病因尚不十分清楚。其发生与吸烟、饮酒、高脂肪和高蛋白饮食、过量饮用咖啡、环境污染及遗传因素有关;近年来的调查报告发现糖尿病人群中胰腺癌的发病率明显高于普通人群;也有人注意到慢性胰腺炎病人与胰腺癌的发病存在一定关系,发现慢性胰腺炎病人发生胰腺癌的比例明显增高。
实验动物背景信息

人胰腺癌细胞株SW1990来自ATCC,为高转移人胰腺癌细胞株,于1978年取自一名58岁胰尾癌并脾转移的男性患者,CEA 阳性,1979年患者死于肝转移。SW1990 由美国学者Kyriazis等建株。具有侵袭力强、转移效率高和转移范围大的特点。

裸鼠无胸腺裸鼠(Nude Mouse,简称裸鼠),先天性胸腺缺陷的突变小鼠,是由于第Ⅶ连锁群(Linkage group)内裸体位点的等位基因发生纯合而形成的突变小鼠新品种。裸鼠(纯合子nu/nu突变鼠)主要表现为无毛(但可看到一种细毛组织学证明有被毛滤泡)以及缺乏正常胸腺。

模型制作方法

1.表达载体构建:构建chicken β-actin-luc-NEO载体。CAG启动子由巨细胞病毒(the cytomegalovirus,CMV)早期增强子(early enhancer element)和鸡β-肌动蛋白( chicken beta-actin )启动子组成,用于驱动基因在哺乳动物载体的高水平表达。

2. SW1990-LUC荧光细胞系的获得:采用脂质体2000转染SW1990细胞,转染后24 h,用含有G418的培养液筛选细胞三周,获得稳定表达luciferase的细胞株,选择其中高表达的克隆株扩大培养。

3. 肿瘤细胞的植入及活体荧光成像:收集处于生长对数期的转染细胞,稀释至5×106/mL。取BALB/CA- nu裸鼠麻醉,0.1mL/只接种于胰腺被膜。分别在接种的第7、14、21和28天四个时间点观察肿瘤的生长及转移情况情况。观察前每只小鼠腹腔注射荧光素底物(1.5mg/10 g),饱和三溴乙醇(0.18 mL/10 g)麻醉后放入活体荧光影像系统摄像,Slide Book 4.0软件进行分析。

动物模型的评价与验证
保存方式 液氮冻存
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