小鼠膀胱癌移行细胞BTT绿色荧光标记肿瘤模型
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发布时间:2024-05-21 08:15:32 更新时间:2024-10-29 18:09:20
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资源中文名称 | 小鼠膀胱癌移行细胞BTT绿色荧光标记肿瘤模型 |
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资源英文名称 | BTT739-eGFP |
疾病概述 | 膀胱癌(bladder cancer)是指发生在膀胱黏膜上的恶性肿瘤。是泌尿系统最常见的恶性肿瘤,也是全身十大常见肿瘤之一。 |
实验动物背景信息 | BTT739为低分化小鼠膀胱移行细胞癌,T739近交系小鼠经化学致癌剂BBN诱导产生的膀胱肿瘤,诱导26周时,将其中1只雄性小鼠膀胱癌往同种系小鼠皮下移植获成功。并培养成细胞系。在同系小鼠移植成功率100%,无自然消退现象,带瘤小鼠平均存活54天。 T739近交系小鼠是天津医药科学研究所培育的一株土黄色近交系小鼠,是615近交系小鼠和昆明种小鼠杂交后兄妹交配培育成功的。 |
模型制作方法 | 1.表达载体构建:构建chicken β-actin-luc-NEO载体。CAG启动子由巨细胞病毒(the cytomegalovirus,CMV)早期增强子(early enhancer element)和鸡β-肌动蛋白( chicken beta-actin )启动子组成,用于驱动基因在哺乳动物载体的高水平表达(图1)。
图1 带有荧光素酶基因表达载体的构建 2. BTT739-eGFP荧光细胞的获得:采用脂质体2000转染小鼠膀胱癌移行细胞,转染后24 h,用含有G418的培养液筛选细胞三周,获得稳定表达luciferase的细胞株,选择其中高表达的克隆株扩大培养,细胞形态见图2。
图2 BTT739-eGFP细胞形态 3. 肿瘤细胞的植入及活体荧光成像:收集处于生长对数期的转染细胞,稀释至5×106/mL。取T739小鼠进行皮下接种,1×106个细胞/只。观察前每只小鼠腹腔注射饱和三溴乙醇(0.18 mL/10 g)麻醉后放入活体荧光影像系统摄像,Slide Book 4.0软件进行分析。 |
动物模型的评价与验证 | |
保存方式 | 液氮冻存 |
更多相关 | 动物模型制备 |
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