心脏组织特异性过表达cTnIR145G转基因肥厚型心肌病小鼠模型
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发布时间：2023-03-01 16:09:03
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| 资源中文名称 | 心脏组织特异性过表达cTnIR145G转基因肥厚型心肌病小鼠模型 |
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| 资源英文名称 | |
| 疾病概述 | 肥厚型心肌病（Hypertrophic cardiomyopathy, HCM） |
| 实验动物背景信息 | 心脏组织特异性过表达cTnIR145G转基因肥厚型心肌病小鼠模型 |
| 模型制作方法 | 扩增并经测序比对正确的cTnIR145G突变片段插入α-MHC启动子下游构建心脏特异表达cTnIR145G表达载体。用显微注射法将线性化的转基因载体注射到C57BL/6J小鼠的受精卵中，用ICR小鼠作假孕受体，制备转基因小鼠。PCR法鉴定小鼠基因型，Western Blot分析cTnIR145G突变蛋白的表达情况（图1）。实验中涉及动物的操作程序已经得到中国医学科学院医学实验动物研究所实验动物使用与管理委员会的批准（GC05004）。
图1. cTnIR145G转基因小鼠模型的建立及鉴定 将cTnIR145G突变基因片段插入α-MHC心脏组织特异性启动子下游构建转基因表达载体(A). PCR法鉴定小鼠基因型(B), M: 分子量标记; 1: 阳性对照; 2: 阴性对照; 3: 空白对照; 5,8: cTnIR145G阳性转基因小鼠; 4,6,7: 阴性转基因小鼠. Western Blot分析LMNAE82K突变蛋白表达(C), WT: 同龄阴性对照小鼠; F028,24,4,45: 首建鼠28,24,4,45号; GAPDH: 内参.灰度扫描定量分析蛋白表达情况(D). |
| 模型表型数据 | 1、从24号转基因系仔代小鼠从出生后即陆续出现死亡，最早记录为17天，最长记录为出生后60天，至小鼠3月龄观察期终点时，经Spss16.0软件Kaplan-Meier curves分析显示，24号转基因系，与NTG小鼠、4号及45号两系小鼠及相比，生存率具有显著性差异[图2，F024, 0% (n = 37); F04, 100% (n = 16); F045, 96% (n = 25); P < 0.001]，而4号和45号两系小鼠与NTG小鼠生存率无显著性差异。
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