心脏组织特异性过表达KCNQ1V180LQT间期延长综合症转基因小鼠模型
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发布时间：2023-03-02 08:59:19
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| 资源中文名称 | 心脏组织特异性过表达KCNQ1V180L QT间期延长综合症转基因小鼠模型 |
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| 资源英文名称 | |
| 疾病概述 | QT间期延长综合症（long QT syndrome，LQTS） |
| 实验动物背景信息 |
心脏组织特异性过表达KCNQ1V180L QT间期延长综合症转基因小鼠模型 |
| 模型制作方法 |
扩增并经测序比对正确的KCNQ1V180L突变片段插入α-MHC启动子下游构建心脏特异表达KCNQ1V180L表达载体。用显微注射法将线性化的转基因载体注射到C57BL/6J小鼠的受精卵中，用ICR小鼠作假孕受体，制备转基因小鼠。PCR法鉴定小鼠基因型，Western Blot分析KCNQ1V180L突变蛋白的表达情况（图1）。实验中涉及动物的操作程序已经得到中国医学科学院医学实验动物研究所实验动物使用与管理委员会的批准（ILAS-GC-2012-001）。
图1. KCNQlV180L转基因小鼠的建立 (A) 将靶基因KCNQlV180L插入心脏特异表达的α-MHC启动子下游，构建KCNQlV180L转基因表达载体；(B) PCR鉴定KCNQlV180L转基因小鼠基因型，M: DNA分子量标记；1：阳性对照；2：阴性对照；3：空白对照；6，8：阳性转基因小鼠；4，5，7：阴性转基因小鼠；(C) Western Blot分析KCNQl蛋白在转基因小鼠心脏组织中的表达。 |
| 模型表型数据 | 1、转基因小鼠出生后离乳前即出现猝死，最早记录为15天，最长记录为7月龄，死亡主要发生在出生后20天内，病理解剖大体观察未见明显心肌病变异常。至小鼠8月龄观察记录终点时转基因系小鼠的存活率为79.3%，阴性小鼠无死亡发生。Spss16.0软件Kaplan-Meier curves分析显示，转基因小鼠（n = 29）与阴性小鼠（n = 37）相比，死亡率具有显著性差异（图2，P < 0.01）。
图2. KCNQlV180L转基因小鼠生存率分析 注：从出生后至8月龄时，阴性对照小鼠（n=37）无死亡发生，经Spss16.0软件Kaplan-Meier curves分析，KCNQlV180L转基因小鼠死亡率显著性增加（n=29, P < 0.01）。
2、1、3、5和7月龄KCNQlV180L转基因小鼠左室收缩和舒张末期内径显著减小（P<0.05；P<0.01），1和3月龄小鼠左室后壁厚度显著增加（P<0.05，P<0.01），从5月龄开始转基因小鼠与阴性对照小鼠室壁厚度差异消失。1月龄小鼠短轴缩率显著增大（P<0.001），从3月龄开始转基因小鼠与阴性对照小鼠短轴缩率差异消失（表1和图3A）。 |
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