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SIVmac251静脉途径感染恒河猴模型

发布时间:2023-03-03
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资源中文名称 SIVmac251静脉途径感染恒河猴模型
资源英文名称 Rhesus Macaques intravenously infected with SIVmac251
疾病概述 艾滋病(Acquired Immunodeficiency Syndrome, AIDS),是由人免疫缺陷病毒(Human Immunodeficiency Virus, HIV)引起,以全身免疫系统严重损害为特征的传染性疾病,是20世纪危害人类健康和生命最严重的病毒性疾病之一。自美国CDC报道首例艾滋病后,到20世纪80年代中期艾滋病发展成为一个全球性的流行病。截止2014年底,HIV已感染3690万人,2014年新增感染者200万,2014年因艾滋病死亡120万人。艾滋病在1985年传入我国,截至2015年5月31日,全国历年累计报告艾滋病530628例,其中艾滋病病人217457例,死亡167159例。艾滋病早已成为全球关注的公共卫生和社会热点问题,艾滋病的预防与治疗也成为当代生物医学研究的前沿热点之一。
实验动物背景信息 恒河猴又名孟加拉猴、狝猴或广西猴。学名为(Macaca mulatta),英文名rhesus macaque。分类所属为哺乳纲(Mammalia),灵长目(Primates),人猴猿亚目(Anthopoidea),猴科(Cercopithecidae),狝猴属(Macaca)。月经周期为28(1-4)天,发情期为11-12个月,怀孕期163天,产仔期3-6个月,胎产仔1-2只,出生重250-380g,哺乳期3-7个月。 狝猴属中,恒河猴使用最广。因分子生物学进展,栗色狝猴用于生理、生化、遗传、血型及免疫等方面的研究更多,病理研究也不少,常用于医疗和药物实验等。 在生物学研究方面可用于生理学、心理学、遗传学的各种研究。 在生理学研究方面可用于脑功能、血液循环、呼吸生理、生殖生理、内分泌和老年学等各项实验。 在医学研究方面可用于感染人类所特有的传染病,特别是其他动物不能复制的传染病 药物学研究方面,预防小儿麻痹的糖丸,恒河猴是唯一的试验对象 ,人类避孕药物的研究,用恒河猴作试验是极为理想的,此外,恒河猴还常用于放射病出血和骨髓移植的实验。 (一)传染病学研究 (二)药理学和毒理学研究 (三)生殖生理研究 (四)口腔医学研究 (五)行为学和高级神经活动研究 (六)营养、代谢研究 (七)老年病研究 (八)器官移植和眼科研究 (九)内分泌病和畸胎学研究 (十)肿瘤学和环保研究 20世纪60年代出版的《狝猴文献录》中,涉及论文的多达五百余篇;在12种狝猴中,使用栗色狝猴的几乎占一半;试加分析,解剖文章占半数,生理学和生态学其次,再次是分类、地理分布、胚胎、进化、遗传和生化病理各有二十余篇,最少的是古生物和畜养、管理的文章。
模型制作方法

1 实验用病毒:感染毒株为SIVmac251中国恒河猴细胞适应株,中国恒河猴PBMCs滴定TCID50滴度为5×103 TCID50/mL

2 感染动物:选用体重4-6kgSPF恒河猴。实验前体检无异常,必须排除猴免疫缺陷病毒(SIV)、猴逆转录D型病毒(SRV-125)和猴T淋巴细胞性I型病毒(STLV-1)的感染。猴免疫缺陷病毒(SIV)易感性密切相关的4种基因(Mamu-A*01Mamu-A*02Mamu-B*08Mamu-B*17)筛查结果为阴性。所有感染动物必须在ABSL-3室中进行。

3 感染方法:将1 mL含有50 TCID50 SIVmac251病毒经后肢静脉接种恒河猴。

4 SIVmac251静脉感染猴样品采集和指标测定:在感染前和感染后7142128425684112140168196231259287天采集EDTA抗凝血4mL,分别测定血常规、血浆病毒载量、CD4+/CD8+CD4+细胞绝对数。

5 SIVmac251静脉感染猴血浆病毒载量的测定:提取EDTA抗凝血浆中病毒RNA,使用SYBR Green I 实时荧光定量RT-PCR方法测定血浆病毒载量。

6 SIVmac251静脉感染猴外周血CD4+/CD8+比值及绝对数测定:CD3-PerCPCD4-FITCCD8-PE抗体标记EDTA抗凝全血淋巴细胞,流式细胞仪测定CD4+/CD8+比值,并根据血常规结果,计算出CD4+T细胞绝对数。

动物模型的评价与验证 模拟静脉的感染方式,用于艾滋病研究 。
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