数据非依赖型采集模式(Data-Independent Acquisition, DIA)逐渐崭露头角。相较于 DDA 数据采集模式在一级质谱中每个时间窗口采集较高的有限肽段离子(通常是 TOP20)进入二级质谱进行碎裂分析。DIA 将质谱整个全扫描范围分为若干个窗口,高速、循环地对每个窗口中的所有离子进行选择、碎裂及检测,从而无遗漏、无差异地获得样本中所有离子的全部碎片信息。
蛋白提取〉酶解消化>肽段分级〉DDA模式〉DIA模式〉定性定量〉数据分析
l 常规动物组织(脑、心、肝、脾、肺、肾、肌肉、皮肤等):送样量>200mg;
l 常规植物组织(幼嫩的根、叶、花、愈伤组织等):送样量>1g;
l 悬浮/贴壁细胞:送样量>1x107个细胞或体积>50ul细胞沉淀;
l 血浆/血清样本:送样量>500ul;
l 微生物菌体:送样量湿重>100mg或体积>100ul。
l 在蛋白质制备过程中使组织始终置于冰上,离心机、离心管等仪器设备要提前预冷,以防蛋白质的降解;
l 要加入适量的裂解液,裂解一定要充分、均匀;
l 植物和动物组织样本一般采用研磨或匀浆机破碎处理,细胞和菌体样本一般采用超声破碎,破碎过程中要避免材料的融化;
l 对预处理好的材料,若不立即进行实验,应冷冻保存(-80℃),对于易分解的生物大分子应选用新鲜材料制备;
l 对于样本量需求少的研究,如果组织样品本身非常细小,可直接裂解,以减少蛋白质的损失。
l 实验步骤
l 液相/质谱参数
l 质谱谱图
l 蛋白质的鉴定定量信息
l 生物信息分析
1、填写申请表:联系中析研究所工作人员确认检测标准,签订委托书;
2、安排寄样:将样品快递或直接送至我司实验室 ;
3、产品检测:实验室安排测试,出草稿报告;
4、确认草稿报告,发正式报告。
A、中析研究所拥有较全面的仪器设备,及多余年经验的工程师团队。
B、提供顾问式服务,行业广,针对客户需求制定对应解决方案。
C、各领域一站式技术服务,六大检测实验室,全程专人对接,客户可实时了解报告进度
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