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抑菌环试验

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发布时间：2024-05-21 08:15:32 更新时间：2025-02-18 14:33:58

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　　抑菌环试验检测去哪里做?中析研究所检测中心可对各类抑菌环试验检测，出具第三方抑菌环试验检测报告。

检测范围

　　磺胺类药物，抗菌纺织品、蜂胶牙膏、蜂胶提取物、

检测项目

　　抑菌圈，环境监测，最小抑菌浓度(MIC)研究以及中和研究(ASTM E1054)。

检测标准

　　GB/T 39101-2020多肽抗菌性测定抑菌圈法

　　SN/T 4946-2017食品接触材料检测方法纸、再生纤维素材料纸和纸板抗菌物质判定抑菌圈定性分析测试法

　　GB/T 38483-2020微生物源抗生素类次生代谢产物抗细菌活性测定抑菌圈法

检测流程

　　1、填写申请表：联系中析研究所工作人员确认检测标准，签订委托书;

　　2、安排寄样：将样品快递或直接送至我司实验室 ;

　　3、产品检测：实验室安排测试，出草稿报告;

　　4、确认草稿报告，发正式报告。

中析研究所和其他第三方有什么区别?

　　A、中析研究所拥有较全面的仪器设备，及多余年经验的工程师团队。

　　B、提供顾问式服务，行业广，针对客户需求制定对应解决方案。

　　C、各领域一站式技术服务，六大检测实验室，全程专人对接，客户可实时了解报告进度

　　1. 原理

　　利用抑菌剂不断溶解经琼脂扩散形成不同浓度梯度，以显示其抑菌作用。试验通过抑菌

　　环大小以判断其是否具有抑菌能力。本试验适用于抑菌剂与溶出性抗(抑)菌产品的鉴定。

　　2. 试验器材

　　(1)金黄色葡萄球菌(ATCC 6538)、大肠杆菌(8099)、白色念珠菌(ATCC 10231)

　　菌悬液(见2.1.1.2)及根据抑菌剂特定用途所用的其他菌悬液。

　　(2)抑菌剂载体(5 mm 直径园形新华一号定性滤纸片，经压力蒸汽灭菌处理后，置120℃烤干2h，保存备用)。

　　(3)活菌培养计数所需器材(见2.1.1.3)。

　　(4)微量移液器(5μl～50μl，可调式)。

　　(5)游标卡尺。

　　(6)营养琼脂培养基、胰蛋白胨大豆琼脂培养基与沙堡琼脂培养基

　　3. 操作程序

　　(1)抑菌片的制备:对液体抑菌剂，取无菌并干燥的滤纸片。每片滴加实际使用浓度抑菌剂溶液20μl，然后将滤纸片平放于清洁的无菌平皿内，开盖置温箱(37℃) 中烤干，或置室温下自然干燥后备用。溶出性抗(抑)菌产品，可直接制成直径为 5mm，厚不超过4mm圆片(块)，每4 片(块) 一组。

　　(2)阴性对照样片的制备:取无菌干燥滤纸片，每片滴加无菌蒸馏水20μl，干燥后备用。溶出性抗(抑)菌产品的阴性对照样本，应取同种材质不含抑菌成份的样品，制成与试验组大小相同的样片(块)。

　　(3)试验菌的接种:用无菌棉拭子蘸取浓度为5×105cfu/ml～5×106cfu/ml 试验菌悬液，在营养琼脂培养基平板表面均匀涂抹3次。每涂抹1次，平板应转动60°，最后将棉拭子绕平板边缘涂抹一周。盖好平皿，置室温干燥5min。

　　(4)抑菌剂样片贴放:每次试验贴放1个染菌平板，每个平板贴放4片试验样片，1 片阴性对照样片，共 5 片。用无菌镊子取样片贴放于平板表面。各样片中心之间相距 25mm以上，与平板的周缘相距 15mm 以上。贴放好后，用无菌镊子轻压样片，使其紧贴于平板表面。盖好平皿，置37℃温箱，培养16h～18h 观察结果。用游标卡尺测量抑菌环的直径 (包括贴片) 并记录。试验重复3次。测量抑菌环时，应选均匀而完全无菌生长的抑菌环进行。测量其直径应以抑菌环外沿为界。

　　4. 评价规定

　　(1)抑菌作用的判断: 抑菌环直径大于7mm 者，判为有抑菌作用。抑菌环直径小于或等于7mm 者，判为无抑菌作用。

　　(2) 3 次重复试验均有抑菌作用结果者，判为合格。

　　(3)阴性对照组应无抑菌环产生。否则试验无效。

　　5. 注意事项

　　(1)每次试验均应设置阴性对照，不可省略。在报告中亦必须将对照组的结果列出。

　　(2)接种用细菌悬液的浓度应符合要求。浓度过低，接种菌量少，

　　抑菌环常因之增大; 浓度过高，接种量过多，抑菌环则可减小。

　　(3)应保持琼脂浓度的准确性，否则可影响抑菌环的大小。

　　(4)培养时间不得超过18h。培养过久，部分细菌可恢复生长，抑菌环变小。

　　(5)抑菌环直径可受抑菌剂的量、抑菌性能和干湿度影响。故抑菌剂滤纸片应在试验当天制备。

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