小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验检测概述
小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验（Micronucleus Test, MN Test）是一种广泛应用于毒理学和遗传毒理学研究的经典检测方法，主要用于评估化学物质、药物或环境污染物对生物体染色体的损伤效应。微核是细胞分裂后残留于胞质中的染色体片段或整条染色体，其形成与染色体断裂或纺锤体功能异常相关。通过观察骨髓中嗜多染红细胞（PCE）的微核率，可快速、灵敏地检测受试物的潜在遗传毒性，为安全性评价提供重要依据。
检测项目与核心指标
该试验的核心检测项目包括：
1. 微核发生率：计算每1000个嗜多染红细胞中含微核的细胞数量（‰）；
2. 嗜多染红细胞/成熟红细胞比例（PCE/NCE）：评估受试物对骨髓造血功能的抑制作用；
3. 剂量-效应关系分析：通过不同剂量组的对比，判断毒性的可重复性和相关性。
其中，微核率的显著性升高是判定遗传毒性的关键指标。
检测仪器与设备
试验涉及的主要仪器包括：
1. 光学显微镜（配备100倍油镜）：用于观察和计数微核；
2. 细胞离心涂片机：制备均匀的骨髓细胞涂片；
3. 恒温培养箱：控制染毒后小鼠的饲养环境；
4. 全自动细胞图像分析系统（可选）：提高微核识别的效率和准确性；
5. 电子天平与微量注射器：精确控制受试物剂量。
检测方法与步骤
试验流程遵循标准化操作：
1. 动物分组与染毒：将健康小鼠随机分为阴性对照、阳性对照（如环磷酰胺）及受试物组，通过灌胃或腹腔注射给予受试物；
2. 采样时间设定：通常在染毒后24-48小时采集股骨骨髓；
3. 骨髓细胞制备：用胎牛血清混悬骨髓细胞，离心涂片并固定；
4. 染色处理：采用May-Grünwald/Giemsa双染法区分PCE和NCE；
5. 镜检计数：盲法随机观察至少2000个PCE，记录微核数量。
检测标准与结果判定
试验需严格遵守国际和国内标准：
1. OECD指南（OECD TG 474）：规定试验设计、剂量选择及数据分析要求；
2. 中国国标（GB 15193.5-2014）：明确微核试验的技术规范；
3. 结果判定标准：
- 微核率与阴性对照组相比具有统计学显著性（P<0.05）；
- 呈现剂量-反应关系；
- PCE/NCE比值需>0.1，排除细胞毒性干扰。
阳性结果提示受试物可能具有遗传毒性风险，需进一步验证。
注意事项与局限性
试验中需特别注意：
1. 动物品系选择（推荐使用SPF级昆明小鼠或C57BL/6小鼠）；
2. 染毒时间和采样窗口期的精确控制；
3. 避免主观计数误差，建议双人独立复核；
4. 假阳性/假阴性的排查（如强细胞毒性物质可能抑制微核形成）。
尽管该方法灵敏度高、成本低，但无法区分染色体断裂与非整倍体效应，需结合其他遗传毒性试验综合评估。
CMA认证
检验检测机构资质认定证书
证书编号：241520345370
有效期至：2030年4月15日
CNAS认可
实验室认可证书
证书编号：CNAS L22006
有效期至：2030年12月1日
ISO认证
质量管理体系认证证书
证书编号：ISO9001-2024001
有效期至：2027年12月31日
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