非洲木薯花叶病毒(类)检测
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发布时间:2025-05-14 01:07:41 更新时间:2025-05-13 21:43:17
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作者:中科光析科学技术研究所检测中心
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非洲木薯花叶病毒(African cassava mosaic virus, ACMV)及其相关病毒类是危害木薯作物的主要病原体之一,属于双生病毒科(Geminiviridae)的菜豆金色花叶病毒属(Begomovirus)。该病毒通过烟粉虱(Bemisia tabaci)传播或带毒种苗扩散,导致木薯叶片出现黄化、卷曲、花叶等症状,严重时可造成植株矮化甚至绝收,对非洲、亚洲及拉丁美洲的木薯产业构成重大威胁。由于木薯是全球近8亿人口的主粮作物,及时、准确的病毒检测对保障粮食安全、控制病害传播及选育抗病品种具有重要意义。
针对非洲木薯花叶病毒(类)的检测主要涵盖以下项目:
1. 病原检测:通过分子生物学或免疫学方法直接检测病毒核酸或蛋白。
2. 传播媒介检测:分析烟粉虱携带病毒的频率及病毒株系。
3. 种苗检疫:确保无病毒种苗用于种植,阻断垂直传播途径。
4. 抗病品种筛选:评估木薯品种对病毒的耐受性或抗性。
常用检测仪器包括:
- PCR仪:用于病毒DNA的扩增与定性分析。
- 凝胶电泳系统:检测PCR产物大小以确认病毒存在。
- 荧光定量PCR仪(qPCR):定量分析病毒载量。
- 酶联免疫吸附测定仪(ELISA):通过抗体检测病毒外壳蛋白。
- 电子显微镜:观察病毒颗粒形态(双生病毒特征的双联体结构)。
- 高通量测序平台:用于病毒基因组测序及变异分析。
主要检测技术包括:
1. PCR检测法:设计特异性引物(如ACMV CP基因引物),通过DNA提取、扩增及电泳分析确认病毒。
2. 环介导等温扩增(LAMP):无需复杂设备,适用于田间快速筛查。
3. ELISA检测:利用单克隆抗体捕获病毒抗原,适合大规模样本初筛。
4. 分子杂交技术:采用标记探针与病毒DNA结合,灵敏度高。
5. 血清学试纸条:基于胶体金免疫层析技术,实现现场即时检测。
国际与国内主要依据以下标准:
- 国际标准:FAO《木薯病害诊断规程》、OIE《植物病毒检测指南》。
- ISO 16140系列:验证分子与免疫学检测方法的有效性。
- 中国国家标准GB/T 28067:针对双生病毒的核酸检测技术要求。
- 非洲区域标准(IITA):规定木薯种苗病毒检测阈值与处理流程。
非洲木薯花叶病毒(类)检测需结合分子生物学、免疫学及田间监测技术,通过标准化流程确保结果准确性。随着CRISPR-Cas等新型检测技术的发展,未来将进一步提升检测灵敏度与效率,为全球木薯产业的可持续发展提供技术保障。
证书编号:241520345370
证书编号:CNAS L22006
证书编号:ISO9001-2024001
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