您现在的位置：首页 > 检测项目 > 其他检测

传染性皮下和造血器官坏死检疫检测

1对1客服专属服务，免费制定检测方案，15分钟极速响应

可选形式：电子报告纸质报告

可选语言：中文报告英文报告

发布时间：2025-05-14 02:14:46 更新时间：2025-05-13 02:14:48

点击：0

作者：中科光析科学技术研究所检测中心

传染性皮下和造血器官坏死病（IHHN）概述

传染性皮下和造血器官坏死病（Infectious Hypodermal and Hematopoietic Necrosis, IHHN）是一种由IHHNV病毒（对虾传染性皮下和造血器官坏死病毒）引起的甲壳类动物严重传染性疾病，主要影响对虾养殖业。该病毒可通过水平传播（如污染水体、饵料）和垂直传播（亲虾携带）扩散，感染后会导致幼虾生长迟缓、畸形、表皮白斑及高死亡率，成年虾则可能成为无症状携带者。由于其高传染性和对产业的潜在威胁，IHHN被世界动物卫生组织（OIE）列为必须申报的疫病之一，检疫检测成为防控的关键环节。

检测项目

IHHN检疫检测主要包括以下核心项目：
1. 病原检测：通过分子生物学方法直接检测病毒核酸；
2. 抗体检测：利用血清学技术识别宿主免疫反应；
3. 组织病理学检查：观察靶器官（如造血组织、表皮）的病理变化；
4. 生物测定：通过健康对虾攻毒实验验证病毒感染性。

检测仪器

针对不同检测需求，常用仪器包括：
- PCR仪及电泳设备：用于核酸扩增及产物分析；
- 荧光定量PCR系统（qPCR）：实现病毒载量定量检测；
- 酶标仪：支持ELISA法抗体检测；
- 显微成像系统：用于组织切片观察和病理分析；
- 电子显微镜：直接观察病毒颗粒形态。

检测方法

1. 分子生物学检测
采用巢式PCR（nested PCR）或实时荧光定量PCR（qPCR）技术，针对IHHNV的保守基因序列（如NS1基因）设计特异性引物，可检测低至10²拷贝/μL的病毒核酸，灵敏度达95%以上。
2. 血清学检测
利用单克隆抗体开发的双抗体夹心ELISA法，通过检测病毒衣壳蛋白VP28抗原，适用于大批量样本筛查，检测特异性超过98%。
3. 组织病理学检测
取对虾鳃丝、造血组织等制作石蜡切片，HE染色后观察特征性病变：
- 造血组织细胞核固缩、胞质嗜碱性包涵体
- 表皮基底细胞坏死形成空泡化区域
4. 原位杂交技术
采用地高辛标记的核酸探针与病毒RNA特异性结合，可在组织切片中精确定位病毒感染部位。

检测标准

国际及国内主要依据以下标准开展检测：
- OIE《水生动物卫生法典》：规定巢式PCR为确诊金标准；
- GB/T 25878-2010（中国）：对虾IHHNV检测技术规范；
- SN/T 1675-2014：进出境对虾检疫规程；
- ISO/TS 15216-2:2013：水产动物病毒分子检测通用要求。
需注意：PCR检测需设置阳性对照（含病毒质粒）和阴性对照（无模板及非感染样本），ELISA检测需通过棋盘滴定法优化抗体工作浓度。