马媾疫检疫检测
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发布时间:2025-05-14 03:42:32 更新时间:2025-05-13 21:43:51
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作者:中科光析科学技术研究所检测中心
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马媾疫(Dourine)是由锥虫属寄生虫(Trypanosoma equiperdum)引起的一种马属动物(马、驴、骡)的慢性传染性疾病,主要通过交配传播。该病被世界动物卫生组织(OIE)列为必须通报的动物疫病,因其对马匹繁殖性能和畜牧业经济造成严重威胁,检疫检测成为防控的核心环节。检疫检测不仅能及时发现感染个体,还可通过隔离、扑杀等手段阻断传播链,保障种马质量和国际贸易安全。
马媾疫的检测项目主要包括以下四类:
1. 病原学检测:直接观察生殖道分泌物或血液中的锥虫体;
2. 血清学检测:检测血清中特异性抗体(如补体结合试验、ELISA);
3. 分子生物学检测:通过PCR技术检测病原体DNA;
4. 临床症状观察:生殖器水肿、皮肤斑块、神经症状等典型病变的评估。
实验室检测需配备以下关键仪器:
- 光学显微镜(含暗视野功能)用于寄生虫形态学观察;
- 离心机(低温高速型)用于样本浓缩处理;
- ELISA检测仪及配套酶标板;
- PCR仪、电泳系统及核酸提取设备;
- 血清学试验所需的微量移液器、恒温水浴箱等。
1. 病原体直接检测法
采用生殖道黏液或血液涂片,经吉姆萨染色后镜检,阳性样本可见典型锥虫体。对慢性病例需结合离心集虫法提高检出率。
2. 补体结合试验(CFT)
作为OIE推荐的传统方法,通过抗原-抗体反应检测血清中的特异性抗体,敏感度约70-80%,但操作复杂且需严格质控。
3. 酶联免疫吸附试验(ELISA)
采用重组抗原或全虫抗原包被,可高通量检测抗体,灵敏度和特异性均优于CFT(可达95%以上),适用于大规模筛查。
4. 实时荧光定量PCR
针对锥虫的18S rRNA基因设计引物,可检测低至10个拷贝的病原DNA,尤其适用于早期感染或隐性携带者的诊断。
国际及国内主要遵循以下标准:
- OIE《陆生动物诊断试验与疫苗手册》第3.5.6章;
- 中国国家标准《GB/T 22330.8-2008 马媾疫诊断技术》;
- 农业农村部《动物疫病监测技术规范》中马病监测要求;
- 实验室需通过ISO/IEC 17025认证,确保检测结果的可追溯性。
检测过程中需注意:样本采集应避开抗生素治疗期,血清样本需-20℃保存,分子检测需防止核酸污染。阳性结果需经两种不同原理的方法复核确认,并结合临床症状综合判定。
证书编号:241520345370
证书编号:CNAS L22006
证书编号:ISO9001-2024001
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