牛副结核病概述

牛副结核病（Paratuberculosis）是由副结核分枝杆菌（Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis, MAP）引起的一种慢性、消耗性传染病，主要感染牛、羊等反刍动物。该病以慢性肠炎、持续性腹泻、进行性消瘦和产奶量下降为特征，对畜牧业经济造成重大损失。由于潜伏期长（2-5年）、早期症状不典型，且病原可通过粪便、乳汁等途径传播，检疫检测成为防控该病的关键环节。国际动物卫生组织（OIE）将其列为须通报疫病，我国也将其纳入二类动物疫病管理范畴，强调通过科学检测手段实现早期诊断和净化。

主要检测项目

牛副结核病的检测项目主要包括病原学检测、血清学检测和分子生物学检测三大类：
1. 病原学检测：通过分离培养病原菌或显微镜观察组织样本中的抗酸杆菌，直接确认感染；
2. 血清学检测：采用ELISA、补体结合试验等方法检测血清中MAP特异性抗体；
3. 分子生物学检测：利用PCR、实时荧光定量PCR等技术检测病原DNA，灵敏度高且特异性强。

常用检测仪器

根据检测方法的不同，需配套专业仪器设备：
- 细菌培养：恒温培养箱、离心机、生物安全柜、荧光显微镜；
- ELISA检测：酶标仪、洗板机、微量移液器；
- PCR检测：PCR扩增仪、电泳系统、凝胶成像仪；
- 病理学检测：组织切片机、染色设备。

检测方法及流程

1. 细菌培养法：采集粪便或肠系膜淋巴结样本，经酸处理去除杂菌后接种于Herrold's卵黄培养基，37℃培养8-12周，观察菌落形态并通过抗酸染色确认；
2. ELISA检测：取血清样本，使用商业化试剂盒（如IDEXX Paratuberculosis Screening Ab Test）按说明书操作，通过酶标仪读取OD值，计算S/P比值判定阴阳性；
3. 实时荧光PCR：提取样本DNA后，针对MAP特异性IS900基因设计引物，通过扩增曲线和Ct值判断结果，可在4小时内完成检测。

检测标准与判定

我国主要依据以下标准执行检测：
- GB/T 18645-2020《动物副结核病诊断技术》规定细菌培养和PCR为确诊方法；
- NY/T 539-2016明确ELISA检测的判定阈值（S/P≥0.3为阳性）；
- 国际参考：OIE《陆生动物诊断试验和疫苗手册》要求PCR检测需包含IS900、ISMAP02和F57基因的复合扩增以提高特异性。

注意事项

检测过程中需注意：
- 粪便样本需低温保存（4℃不超过7天，-20℃长期保存）；
- 血清学检测可能出现与禽结核分枝杆菌的交叉反应，需结合临床表现综合判断；
- PCR检测需设置内参基因（如β-actin）以排除抑制剂干扰；
- 实验室需达到生物安全二级（BSL-2）标准，防止气溶胶污染。

检测机构资质证书

CMA认证

检验检测机构资质认定证书

证书编号：241520345370

有效期至：2030年4月15日

CNAS认可

实验室认可证书

证书编号：CNAS L22006

有效期至：2030年12月1日

ISO认证

质量管理体系认证证书

证书编号：ISO9001-2024001

有效期至：2027年12月31日

关于我们

部分仪器

合作客户