日本乙型脑炎酶联免疫吸附试验检测概述

日本乙型脑炎（Japanese Encephalitis, JE）是由日本乙型脑炎病毒（JEV）引起的一种经蚊媒传播的人畜共患传染病，主要流行于亚洲和西太平洋地区。该病可引起中枢神经系统感染，重症患者死亡率高且常遗留神经系统后遗症，对人类健康构成严重威胁。早期、准确的实验室诊断对临床治疗和疫情控制至关重要。酶联免疫吸附试验（ELISA）因其高灵敏度、特异性和可操作性，成为JEV血清学检测的常用方法，广泛应用于抗体检测、疫苗免疫效果评估及流行病学调查。

检测项目

日本乙型脑炎ELISA检测主要包括以下项目：
1. JEV特异性IgM抗体检测：用于早期诊断，IgM抗体在感染后3-7天出现，持续1-3个月；
2. JEV特异性IgG抗体检测：用于回顾性诊断或免疫效果评价，IgG抗体在感染后期及恢复期明显升高；
3. 抗原检测：特定实验条件下可检测脑脊液或血液中的病毒抗原。

检测仪器

ELISA检测需配备以下核心仪器：
- 酶标仪（微孔板读数仪）：用于测量反应后的吸光度值；
- 洗板机：实现自动化洗板操作；
- 恒温孵育箱：控制反应温度（通常37℃±1℃）；
- 微量移液器及多通道移液器：用于精准加样；
- 震荡混匀器：确保试剂均匀混合。

检测方法

ELISA检测采用双抗原夹心法或间接法流程：
1. 样本处理：采集血清/脑脊液样本，离心去除杂质；
2. 包被抗原：将JEV特异性抗原固定于微孔板；
3. 加样孵育：加入待检样本和酶标二抗，37℃孵育；
4. 显色反应：加入底物（如TMB）催化显色；
5. 终止读数：加终止液后通过酶标仪测定OD值；
6. 结果判读：计算临界值（Cut-off值），判定阴阳性。

检测标准

本检测需遵循以下标准规范：
- GB/T 18638-2020《日本乙型脑炎诊断技术》中国国家标准；
- WS/T 560-2017《日本脑炎诊断》卫生行业标准；
- WHO《Laboratory Manual for Japanese Encephalitis Surveillance》；
- 试剂说明书要求：不同品牌试剂盒需按推荐参数优化反应条件；
- 实验室需通过ISO 15189或GLP认证，确保检测质量。

检测机构资质证书

CMA认证

检验检测机构资质认定证书

证书编号：241520345370

有效期至：2030年4月15日

CNAS认可

实验室认可证书

证书编号：CNAS L22006

有效期至：2030年12月1日

ISO认证

质量管理体系认证证书

证书编号：ISO9001-2024001

有效期至：2027年12月31日

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