蓝舌病EMAI阻断ELISA抗体检测检测
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发布时间:2025-05-14 04:54:49 更新时间:2025-05-13 21:44:11
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作者:中科光析科学技术研究所检测中心
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蓝舌病(Bluetongue Disease, BT)是由蓝舌病病毒(BTV)引起的一种以库蠓为传播媒介的反刍动物传染病,主要感染绵羊、牛、山羊等家畜,具有高传播性和致死性。为有效防控疫情,抗体检测成为疾病监测和免疫评估的重要环节。其中,EMAI阻断ELISA(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay)抗体检测技术因其特异性强、灵敏度高、操作简便等特点,被广泛应用于蓝舌病病毒抗体的筛查与定量分析。该技术通过检测动物血清中针对BTV的特异性抗体,可评估动物免疫状态或感染史,为疫区防控策略提供科学依据。
蓝舌病EMAI阻断ELISA抗体检测的核心目标是检测动物血清中针对蓝舌病病毒VP7蛋白的特异性IgG抗体。该项目适用于以下场景: 1. 疫区动物群体的抗体水平监测; 2. 疫苗接种后的免疫效果评估; 3. 进出口动物检疫中的蓝舌病筛查; 4. 疫情暴发时的快速诊断与溯源分析。
检测过程中需使用以下关键仪器设备: 1. 酶标仪:用于读取ELISA板孔的光密度(OD值),需配备450nm和630nm双波长滤光片; 2. 洗板机:实现ELISA板的自动化清洗,确保反应一致性; 3. 微量移液器(单道/多道):精确加样,量程范围覆盖1-1000μL; 4. 恒温培养箱:维持37℃恒温环境,确保抗原-抗体反应充分; 5. 振荡器:用于样本与试剂的均匀混合。
EMAI阻断ELISA检测基于竞争性免疫反应原理,具体步骤如下: 1. 抗原包被:将BTV VP7重组抗原固定于ELISA板孔中; 2. 样本孵育:加入待检血清与辣根过氧化物酶(HRP)标记的单克隆抗体混合液,若样本含抗VP7抗体,则会与酶标抗体竞争结合抗原; 3. 洗涤与显色:洗去未结合物质后,加入TMB显色底物,抗体阻断效应越强,显色越弱; 4. 终止与读数:加入终止液后,通过酶标仪测定OD值,计算阻断率(PI值)判断结果。
本检测遵循国际及行业标准,主要包括: 1. OIE《陆生动物诊断试验和疫苗手册》对蓝舌病诊断的技术要求; 2. ISO/IEC 17025实验室质量体系规范; 3. 结果判定阈值:当样本PI值≥40%时判为阳性,30%-40%为可疑(需复检),<30%为阴性; 4. 质控要求:每批次检测需包含阳性对照、阴性对照及空白对照,OD值需符合预设范围。
通过上述标准化流程,EMAI阻断ELISA技术可实现对蓝舌病抗体的高效、准确检测,为动物疫病防控提供可靠的技术支持。
证书编号:241520345370
证书编号:CNAS L22006
证书编号:ISO9001-2024001
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