草鱼出血病检疫检测概述

草鱼出血病（Grass Carp Hemorrhagic Disease, GCHD）是由草鱼呼肠孤病毒（Grass Carp Reovirus, GCRV）引起的一种高度传染性病毒性疾病，主要危害草鱼、青鱼等鲤科鱼类，尤其对幼鱼和亚成鱼致死率极高，是水产养殖业中亟需防控的疫病之一。该病以鱼体表及内脏器官广泛性出血为典型特征，可导致养殖鱼群大规模死亡，造成严重经济损失。为有效预防和控制草鱼出血病的传播，科学、规范的检疫检测流程至关重要。检疫检测需覆盖病原体筛查、流行病学调查、实验室确诊等环节，并依据相关标准采用多种技术手段进行综合分析。

检测项目

草鱼出血病检疫检测的核心项目包括：
1. 病毒分离与鉴定：通过细胞培养或鱼体接种分离病毒，观察细胞病变效应（CPE）。
2. 血清学检测：采用酶联免疫吸附试验（ELISA）或免疫荧光法（IFA）检测病毒特异性抗体。
3. 分子生物学检测：利用RT-PCR、实时荧光定量PCR（qPCR）或基因测序技术检测病毒核酸。
4. 组织病理学检查：通过显微镜观察病鱼肝、脾、肾等组织的出血、坏死等病理变化。

检测仪器

检测过程中需使用以下关键仪器：
- 病毒分离：CO2培养箱、倒置显微镜、离心机。
- 血清学检测：酶标仪、荧光显微镜、微量移液器。
- 分子检测：PCR扩增仪、电泳系统、实时荧光定量PCR仪。
- 病理分析：石蜡切片机、组织染色设备、光学显微镜。

检测方法

1. 样本采集与处理：取病鱼肝、脾、肾等组织匀浆后离心取上清液，或抽取血液分离血清。
2. 病毒分离法：将组织悬液接种于草鱼肾细胞系（CIK细胞），观察4-7天内是否出现细胞圆缩、脱落等病变。
3. RT-PCR检测：针对GCRV的S10或S11基因设计特异性引物，扩增病毒核酸片段并进行电泳验证。
4. 荧光定量PCR：通过TaqMan探针法实现病毒载量的精确定量，灵敏度可达10¹-10²拷贝/μL。
5. 免疫学方法：采用双抗体夹心ELISA检测病毒抗原，检测限约为1.0×10⁴ TCID₅₀/mL。

检测标准

国内外主要参考以下标准：
- 中国标准：农业农村部《NY/T 1158-2020 草鱼出血病诊断技术》规定了临床诊断、病毒分离及分子检测方法。
- 国际标准：OIE《水生动物卫生法典》要求对进出口草鱼实施GCRV核酸检测，采样量不低于30尾/批次。
- 实验室质控：需设置阴性对照（健康鱼组织）和阳性对照（已知GCRV毒株），检测结果需重复验证。

通过以上多维度的检测技术和标准化流程，可高效识别草鱼出血病病原体，为疫情预警、养殖管理和国际贸易提供科学依据。实际应用中建议结合流行病学调查结果，综合采用多种检测方法以提高准确性。

检测机构资质证书

CMA认证

检验检测机构资质认定证书

证书编号：241520345370

有效期至：2030年4月15日

CNAS认可

实验室认可证书

证书编号：CNAS L22006

有效期至：2030年12月1日

ISO认证

质量管理体系认证证书

证书编号：ISO9001-2024001

有效期至：2027年12月31日

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