龟分枝杆菌脓肿亚种定量杀菌试验检测
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发布时间:2025-05-15 12:28:33 更新时间:2025-05-14 12:28:34
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作者:中科光析科学技术研究所检测中心
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龟分枝杆菌脓肿亚种(Mycobacterium chelonae-abscessus)是一种非结核分枝杆菌(NTM),常见于环境及医疗相关感染中。由于其对消毒剂和抗菌药物的高耐受性,其在医院感染控制和消毒产品有效性评价中备受关注。定量杀菌试验是评估消毒剂、抗菌材料或物理方法对龟分枝杆菌脓肿亚种灭活效果的核心手段,通过标准化实验流程,量化杀菌效率,为临床防控和产品质量验证提供科学依据。
定量杀菌试验的主要检测项目包括:
1. 杀菌率(Log10减少值):通过活菌计数计算消毒剂作用前后的微生物存活率;
2. 杀菌动力学曲线:分析不同时间点的杀菌效果变化;
3. 最低有效浓度(MEC):确定消毒剂抑制或杀灭菌株的最低浓度;
4. 中和剂验证:确保试验中消毒剂残留效应被完全中和。
核心检测仪器包括:
- 菌落计数器(用于活菌定量分析);
- 恒温振荡培养箱(维持菌液均匀分布及培养条件);
- 分光光度计(测定菌悬液浓度,OD600值校准);
- 生物安全柜(BSL-2级,保障操作安全性);
- 高压蒸汽灭菌器(实验器材灭菌)。
依据国际标准,试验流程分为以下步骤:
1. 菌悬液制备:采用Middlebrook 7H9液体培养基培养菌株至对数生长期,离心洗涤后调整浓度至1×108 CFU/mL;
2. 中和剂选择:根据消毒剂类型,选用硫代硫酸钠(含氯消毒剂)或卵磷脂(季铵盐类)作为中和剂;
3. 接触时间控制:按标准设定作用时间(通常为5-60分钟),定时取样终止反应;
4. 活菌计数:采用倾注平板法或膜过滤法,接种于Middlebrook 7H10琼脂,37℃培养7-14天后计数;
5. 重复试验:每组试验重复3次,计算平均值及标准差。
试验需遵循以下国际及行业标准:
- CLSI M26-A:抗微生物消毒剂定量杀菌试验指南;
- AOAC 965.12:硬表面杀菌剂效能测试方法;
- ISO 20743:抗菌产品定量评估标准;
- GB/T 38502-2020(中国):消毒剂实验室杀菌效果检验方法。
杀菌效果需满足以下要求:
- 杀菌率≥3.0 Log10(即杀灭99.9%以上菌体);
- 中和剂对照组与阴性对照组无显著差异(p>0.05);
- 试验组数据变异系数(CV)≤15%。报告需包含菌株来源、消毒剂浓度、作用时间、杀菌率及统计学分析结果。
证书编号:241520345370
证书编号:CNAS L22006
证书编号:ISO9001-2024001
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