猪伪狂犬病毒检测
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发布时间:2025-05-19 14:11:22 更新时间:2025-06-09 22:27:29
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作者:中科光析科学技术研究所检测中心
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猪伪狂犬病(Pseudorabies,PR)是由伪狂犬病毒(Pseudorabies Virus,PRV)引起的一种急性、高度接触性传染病,对全球养猪业造成严重经济损失。该病毒可通过呼吸道、消化道及胎盘传播,感染猪群后引发繁殖障碍、呼吸道症状和神经系统病变,新生仔猪死亡率高达100%。由于PRV具有潜伏感染特性,且部分康复猪会成为终身带毒者,定期开展病毒检测是防控疫情、保障养殖安全的核心措施。通过科学的检测手段,能够及时发现感染源、评估免疫效果,并为疫苗选择和生物安全管理提供依据。
猪伪狂犬病毒检测主要包括以下几类项目: 1. 病原学检测:直接检测病毒核酸或抗原,如PCR技术、病毒分离培养; 2. 血清学检测:通过检测抗体水平评估感染状态,如ELISA、中和试验; 3. 分子生物学检测:基因测序分析病毒变异情况,用于流行病学追踪; 4. 组织病理学检测:观察典型病变(如脑炎、肝坏死)辅助诊断。
检测过程中常用的仪器包括: - 实时荧光定量PCR仪:用于病毒DNA的定量检测; - 酶标仪:配合ELISA试剂盒进行抗体滴度测定; - 细胞培养设备(如CO₂培养箱、倒置显微镜):用于病毒分离与扩增; - 电泳仪及凝胶成像系统:分析PCR扩增产物; - 生物安全柜:确保病毒操作的安全性。
1. PCR技术: - 提取样本(鼻拭子、脑组织等)中的病毒DNA; - 使用特异性引物扩增gB、gE等基因片段; - 通过电泳或荧光信号判断结果,灵敏度可达到1拷贝/μL。 2. ELISA检测: - 采用包被PRV抗原的微孔板捕获血清中的抗体; - 通过酶标二抗显色反应判定抗体水平,区分自然感染与疫苗免疫(gE抗体缺失株检测)。 3. 病毒分离: - 将样本接种于PK-15细胞系,观察细胞病变效应(CPE); - 结合免疫荧光技术确认病毒存在。 4. 胶体金试纸条: - 适用于现场快速筛查,15分钟内通过抗原-抗体反应显示结果。
国内外常用的检测标准包括: - OIE标准(《陆生动物诊断试验手册》):规定病毒分离、PCR及血清学检测流程; - 中国国家标准(GB/T 18641-2020):详细描述猪伪狂犬病诊断技术规范; - 行业规范:如NY/T 548-2021中ELISA试剂盒的质量要求; - 生物安全要求:需符合BSL-2实验室标准,防止病毒泄漏。 检测结果需结合临床特征、流行病学背景综合判定,阳性样本需上报动物疫病防控系统。
证书编号:241520345370
证书编号:CNAS L22006
证书编号:ISO9001-2024001
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