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总蛋白(TP)测定试剂盒（双缩脲法）检测

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发布时间：2025-05-24 23:25:09 更新时间：2025-05-23 23:25:09

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作者：中科光析科学技术研究所检测中心

总蛋白(TP)测定试剂盒（双缩脲法）的临床意义与应用

总蛋白（Total Protein, TP）是临床生化检验中的重要指标之一，主要反映机体蛋白质代谢状态。血清或血浆中的总蛋白包括白蛋白和球蛋白，其浓度变化与肝脏功能、肾脏疾病、营养状况及免疫系统疾病密切相关。双缩脲法作为经典的蛋白质定量方法，因其操作简便、重复性好、线性范围宽，被广泛应用于临床实验室。总蛋白(TP)测定试剂盒（双缩脲法）通过特异性的化学反应实现蛋白质浓度的精准测定，为肝炎、肝硬化、肾病综合征等疾病的诊断与监测提供关键依据。

检测项目与适用范围

本试剂盒主要用于血清、血浆或脑脊液样本中总蛋白的定量检测。检测结果可辅助评估以下临床情况：1）肝脏合成功能异常（如慢性肝病）；2）蛋白质丢失性疾病（如肾病综合征）；3）营养不良或吸收障碍；4）多发性骨髓瘤等球蛋白异常增高的疾病。检测范围通常为20-120 g/L，涵盖临床常见病理状态下的蛋白浓度变化。

检测仪器与设备要求

本方法需配合分光光度计或全自动生化分析仪使用，具体要求包括：1）仪器波长范围需支持540±10 nm的检测波长；2）温控系统可维持37±0.5℃的恒温反应条件；3）具备自动混合和计时功能。常用设备包括日立7080型生化分析仪、罗氏Cobas系列或贝克曼AU系列仪器。仪器需定期进行光学校准和质控验证，确保吸光度测定的准确性。

检测方法与操作流程

双缩脲法的核心原理是：在碱性条件下，蛋白质中的肽键与Cu²+形成紫色络合物，其颜色深度与蛋白质浓度成正比。具体步骤如下：
1. 试剂制备：按说明书将R1（含NaOH和酒石酸钾钠）与R2（硫酸铜溶液）以100:1比例混合；
2. 样本处理：血清样本3000 rpm离心10分钟，去除纤维蛋白或颗粒物；
3. 反应体系：样本与工作液按1:50比例混合，37℃孵育10分钟；
4. 比色测定：在540 nm波长下读取吸光度，通过标准曲线计算浓度。
需注意高脂血症样本可能产生浊度干扰，需采用空白校正。

检测标准与质量控制

本检测遵循WS/T 347-2011《血清总蛋白测定》行业标准及CLSI EP系列文件要求。质量控制要点包括：
1. 校准品：使用人血清基质校准品，浓度覆盖60-80 g/L的正常参考区间；
2. 质控规则：采用Westgard多规则质控策略，允许批内CV≤3%，批间CV≤5%；
3. 干扰控制：胆红素≤20 mg/dL、血红蛋白≤5 g/L、甘油三酯≤1000 mg/dL时，偏差应＜5%；
4. 方法学验证：线性相关系数r²≥0.995，回收率控制在95-105%范围内。