卫生指标(霉菌和酵母菌总数)检测
在食品、药品、化妆品及环境监测等领域,微生物污染控制是保障产品安全和质量的关键环节。其中,霉菌和酵母菌作为常见的腐败微生物和潜在致病菌,其数量的监控尤为重要。霉菌和酵母菌总数检测是评价产品卫生状况、生产环境洁净度以及保质期预测的核心卫生指标之一。过高的霉菌和酵母菌数量不仅会导致产品腐败变质、外观劣化、产生异味,某些霉菌还可能产生具有危害性的真菌毒素(如黄曲霉毒素),直接威胁消费者的健康安全。因此,建立准确、高效的霉菌和酵母菌总数检测体系,对于生产企业质量控制、监管部门监督抽查以及保障消费者权益都具有不可或缺的意义。
检测项目
本检测项目的核心目标是定量测定样品(如食品、药品原料、成品、生产用水、接触表面涂抹样、空气沉降样等)中存活的霉菌和酵母菌总数。此“总数”是指在特定培养条件下,单位重量(如克或毫克)、单位体积(如毫升)或单位面积(如平方厘米)的样品中,能够生长形成可见菌落的霉菌和酵母菌的数量之和,通常以菌落形成单位(CFU/g, CFU/mL, CFU/cm²等)表示。
检测仪器
进行霉菌和酵母菌总数检测,需依赖一系列专业设备以保证实验的准确性与生物安全性,主要包括:
- 无菌操作设备: 生物安全柜(提供无菌操作环境,保护样品和操作人员)。
- 样品制备设备: 均质器/拍打式均质袋(用于固体或半固体样品的粉碎与匀浆)、无菌研钵和研钵、无菌稀释瓶、移液器(微量及常量)及无菌吸头。
- 培养设备: 恒温培养箱(温度范围需涵盖20-30℃,通常设定为25-28℃进行霉菌酵母培养)、霉菌培养箱(可精确控制温湿度)。
- 灭菌设备: 高压蒸汽灭菌锅(用于培养基、稀释液及实验器具的灭菌)。
- 微生物培养器具: 无菌平皿(培养皿)、无菌试管。
- 计数设备: 菌落计数器(手动或自动)、放大镜或解剖显微镜(辅助观察微小菌落)。
- 培养基制备设备: 电炉或微波炉、pH计。
检测方法
霉菌和酵母菌总数的标准检测方法通常采用平板计数法(Plate Count Method),核心步骤如下:
- 样品处理与稀释: 在无菌条件下,准确称取或量取有代表性的样品,加入无菌稀释液(常用0.85%生理盐水或蛋白胨缓冲液),使用均质器充分混匀制成初始匀液。根据预估的菌量,进行一系列十倍梯度稀释(如10⁻¹, 10⁻², 10⁻³...),以获得适宜计数的平板(通常目标菌落数为15-150 CFU/皿)。
- 倒平板培养:
- 选择2-3个适宜的连续稀释度。
- 分别吸取1mL各稀释度的样品匀液,注入无菌平皿中。
- 将冷却至约45℃的选择性培养基(常用马铃薯葡萄糖琼脂PDA或孟加拉红培养基)倾注入平皿,立即旋摇平皿使样液与培养基充分混匀。
- 待培养基凝固后,将平皿倒置(防止冷凝水滴落影响菌落生长),放入恒温培养箱中。
- 培养: 在25-28℃下进行培养。培养时间通常为5天(120小时)。部分标准或样品可能要求培养3天后进行初步观察计数,5天后进行最终计数。
- 菌落计数与报告:
- 培养结束后,取出平皿。
- 选择菌落数在15-150 CFU之间的平皿进行计数。
- 霉菌和酵母菌通常形态差异显著:霉菌菌落一般较大、呈绒毛状、棉絮状或蛛网状,颜色多样;酵母菌菌落则通常光滑、湿润、不透明,多为乳白色或奶油色。计数时应仔细区分。有时需借助低倍放大镜观察。
- 根据所选稀释度平皿的菌落数、稀释倍数及接种量,计算每克(或每毫升、每平方厘米)样品中的霉菌和酵母菌总数。
- 结果报告通常表示为:霉菌和酵母菌总数 XXX CFU/g (或 mL, cm²)。
注意事项: 霉菌菌落可能蔓延生长,对于蔓延菌落覆盖面积小于平皿面积一半者,计数未蔓延部分;若超过一半则不宜计数。有时会使用含抑制剂的培养基(如在PDA中加入氯霉素或金霉素)来抑制细菌生长。
检测标准
霉菌和酵母菌总数的检测必须严格遵循国家、行业或国际通用的标准方法,以确保结果的可比性和法律效力。常用的标准包括:
- 中国国家标准 (GB):
- GB 4789.15-2016 食品安全国家标准 食品微生物学检验 霉菌和酵母计数: 这是国内食品领域最权威的标准。
- 药品、化妆品等行业也有相应的国家标准或行业标准规定其霉菌酵母检测方法,通常会参考或等效采用药典方法。
- 中华人民共和国药典 (ChP): 药品微生物限度检查法中详细规定了药品及其原料、辅料、生产环境等中霉菌和酵母菌总数的检测方法。
- 国际标准化组织 (ISO): ISO 21527-1:2008 (Food and feed products - Horizontal method for enumeration of yeasts and moulds - Part 1: Colony count technique in products with water activity greater than 0.95) 和 ISO 21527-2:2008 (Part 2: Colony count technique in products with water activity less than or equal to 0.95)。
- 美国食品药品监督管理局 (FDA): Bacteriological Analytical Manual (BAM) 中 Chapter 18: Yeasts, Molds and Mycotoxins 提供了相关方法。
- 美国药典 (USP): USP <61> Microbiological Examination of Nonsterile Products: Microbial Enumeration Tests。
遵循这些标准确保了检测过程的规范性、培养基选择的正确性、培养条件的统一性以及结果判读的准确性。
综上所述,科学、规范地执行霉菌和酵母菌总数检测,是有效控制微生物污染风险、保障产品卫生安全、满足法规要求的关键技术手段。选择适当的检测标准、使用合格的仪器设备、严格按照标准方法操作并进行准确的计数报告,对于获得可靠的数据至关重要。
CMA认证
检验检测机构资质认定证书
证书编号:241520345370
有效期至:2030年4月15日
CNAS认可
实验室认可证书
证书编号:CNAS L22006
有效期至:2030年12月1日
ISO认证
质量管理体系认证证书
证书编号:ISO9001-2024001
有效期至:2027年12月31日