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赤藓红及其铝色淀（以赤藓红计）检测

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发布时间：2025-06-08 13:54:40 更新时间：2025-06-07 13:54:41

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作者：中科光析科学技术研究所检测中心

赤藓红及其铝色淀（以赤藓红计）检测概述

赤藓红（Erythrosine），又称食品红3号（C.I. 45430），是一种人工合成的水溶性偶氮类红色着色剂，其化学名称为2-(6-羟基-2,4,5,7-四碘-3-氧化-3H-呫吨-9-基)苯甲酸钠，分子式为C₂₀H₆I₄Na₂O₅。赤藓红铝色淀（Erythrosine Aluminum Lake）则是赤藓红与氧化铝反应形成的非水溶性色淀，具有更好的光热稳定性。两者广泛应用于糖果、饮料、糕点、药品包衣、化妆品等产品的着色。由于过量摄入可能对健康产生潜在风险（如甲状腺功能影响），各国法规对其在食品及化妆品中的使用限量和残留量均有严格规定。"以赤藓红计"的检测是指将所有形态（包括游离酸、钠盐及铝色淀）中的赤藓红色素折算成赤藓红母体结构的含量进行统一评估与控制。因此，建立准确、灵敏、可靠的检测方法对保障产品质量安全和市场监管至关重要。

检测项目

针对赤藓红及其铝色淀，核心检测项目包括：

定性检测： 确认样品中是否存在赤藓红或其铝色淀。
定量检测（以赤藓红计）： 精确测定样品中赤藓红（包括游离形式及由铝色淀转化而来）的总含量。
铝色淀鉴别与转化效率验证： 对于铝色淀形态，需验证其在检测前处理过程中是否完全转化为可测量的赤藓红形式。
纯度/杂质检查： 可能包括未碘化中间体、副产物、铅/砷等重金属残留、干燥失重、灼烧残渣（针对色淀）等（尤其针对原料或标准品）。

主要检测仪器

实现上述项目的检测，需依赖以下关键仪器设备：

高效液相色谱仪（HPLC）： 配备紫外-可见光检测器（UV-Vis）或二极管阵列检测器（DAD），是检测赤藓红的核心设备。其优异的分离能力和准确的定量性能是首选。
紫外-可见分光光度计（UV-Vis Spectrophotometer）： 可用于快速筛查或特定条件下的定量分析，尤其适合纯样品或标准溶液。
精密分析天平： 用于精确称量样品和标准品。
pH计： 严格控制样品前处理及流动相的酸碱度。
离心机： 用于样品提取液的固液分离。
超声波提取仪/振荡器： 用于高效提取样品中的色素。
旋转蒸发仪/氮吹仪： 用于样品浓缩。
过滤装置： 包括微孔滤膜（0.22μm或0.45μm）和注射器过滤器，用于样品溶液净化。
恒温水浴锅/烘箱： 用于铝色淀的转化处理（如酸解）。

常用检测方法

目前，国际上普遍认可的赤藓红及其铝色淀（以赤藓红计）的检测方法主要有：

高效液相色谱法（HPLC法）：
- 原理： 利用样品中赤藓红与其他组分在色谱柱上的保留差异进行分离，在特定波长（通常为528nm±2nm，赤藓红最大吸收波长）下检测，通过外标法或内标法定量。
- 样品前处理：
  - 水溶性样品/游离色素： 溶解后直接稀释、过滤。
  - 含基质样品（如食品、化妆品）： 常用水/水-乙醇混合液提取，必要时辅以超声波/加热/调节pH等手段，再离心/过滤净化。
  - 铝色淀样品/含铝色淀产品： 关键步骤是将色淀转化为可溶的赤藓红。通常采用酸解法：样品中加入适量稀盐酸（如1+9 HCl），沸水浴加热或回流一段时间（如10-30分钟），冷却后调节pH至中性或近中性，再定容、过滤。此步骤确保铝色淀完全解离，检测结果准确“以赤藓红计”。
- 色谱条件（示例）： C18反相色谱柱；流动相：甲醇/乙腈 + 乙酸铵缓冲液（pH≈4.0）；梯度或等度洗脱；流速：1.0 mL/min；柱温：30-40℃；检测波长：528nm。
分光光度法：
- 原理： 利用赤藓红在特定波长（528nm）处有最大吸收，根据朗伯-比尔定律，吸光度与浓度成正比关系进行定量。适用于组分简单、干扰少的样品或标准溶液测定。
- 局限性： 易受其他色素或共存物干扰，特异性不如HPLC法。对铝色淀同样需先进行酸解转化。
薄层色谱法（TLC法）：
- 主要用于快速定性或半定量筛查，分离效果和准确性相对较低，应用较少。

HPLC法因其高选择性、高灵敏度和良好的准确性，是目前国内外标准方法的主流。

主要检测标准

赤藓红及其铝色淀的检测需严格遵循相关国家、行业或国际标准，确保结果的权威性和可比性：

中国国家标准 (GB):
- GB 17512.2-2023《食品安全国家标准食品添加剂赤藓红》：规定了赤藓红（含铝色淀）的要求（包括含量要求）、试验方法（含HPLC法测含量）、检验规则等。
- GB 5009.35-2023《食品安全国家标准食品中合成着色剂的测定》：详细规定了食品中多种合成着色剂（包括赤藓红）的HPLC测定方法（第一法）和液相色谱-质谱/质谱法（第二法），涵盖了水溶性色素和色淀的处理（含酸解）。这是食品中赤藓红检测最常用的标准。
- GB 7912-1987《化妆品卫生化学标准检验方法颜料》（虽然较旧，但其酸解转化的原理仍被借鉴用于化妆品中色淀色素的提取）。更现代的化妆品检测方法多参考药监局或行业指南。
国际/国外标准：
- ISO 13752:1998：食品添加剂 - 赤藓红 - 规范（包含测试方法）。
- 美国FDA方法： FDA监管手册中有关色素的检测方法。
- 欧盟标准： 欧洲药典(EP)、食品法典等对赤藓红也有相应规定和方法。
- 日本厚生劳动省标准 (JAS)： 日本食品添加剂公定书中的规定和方法。
限量标准： 检测结果需对照GB 2760-2014《食品安全国家标准食品添加剂使用标准》中规定的赤藓红在不同食品类别中的最大使用量（均以赤藓红计），或《化妆品安全技术规范》中允许使用的范围和限量要求进行合规性判定。