紫外可见分光光度法检测
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发布时间:2025-07-06 07:21:28 更新时间:2025-07-05 07:21:29
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作者:中科光析科学技术研究所检测中心
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紫外可见分光光度法是一种基于物质对特定波长紫外光(200-400 nm)和可见光(400-800 nm)吸收特性的分析方法,广泛应用于化学、生物医药、环境监测和食品工业等领域。该方法的核心原理是 Beer-Lambert 定律(A = εlc),其中吸光度(A)与物质的浓度(c)、光程长度(l)和摩尔吸光系数(ε)成正比,从而实现对目标物质的定量和定性检测。其优势包括操作简便、灵敏度高、成本低且结果可重复性强,常用于快速筛查和精确测量各种样品中的微量成分。例如,在医药研发中,它用于药物纯度测试;在环保领域,用于水质污染物评估;在食品安全中,用于添加剂或有害残留物的分析。随着技术发展,现代紫外可见分光光度法结合了自动化和软件处理,大大提高了检测效率和准确性,使其成为实验室常规分析不可或缺的工具。
紫外可见分光光度法适用于多种检测项目,涵盖化工、医药、环境和食品等行业。具体包括:1. 药物分析,如抗生素(如青霉素)浓度、维生素(如维生素B12)含量测定;2. 环境监测,如水质中的化学需氧量(COD)、重金属离子(如铅、镉)或有机污染物(如苯酚);3. 食品工业,如添加剂(如色素、防腐剂)的定量、农药残留检测;4. 生物化学,如蛋白质浓度(采用 Bradford 法)、核酸(DNA/RNA)纯度评估。这些项目基于物质在特定波长下的吸收峰进行识别和量化,确保分析结果可靠。
主要检测仪器是紫外可见分光光度计,由光源(氘灯或钨灯)、单色器(光栅或棱镜)、样品池(石英或玻璃比色皿)、检测器(光电倍增管或 CCD)和数据处理系统组成。常用仪器型号包括 Shimadzu UV-1800 或 Thermo Fisher NanoDrop 系列,这些设备支持波长扫描(190-1100 nm)、自动进样和软件控制(如 UVProbe 软件)。仪器需定期校准以确保精度,例如通过空白样品和标准物质验证光路稳定性。操作时,样品池需清洁无痕,以避免散射影响测量结果。
检测方法遵循标准流程:1. 样品准备:样品溶解或稀释至适当浓度范围,避免干扰物;2. 标准曲线建立:使用已知浓度的标准溶液测量吸光度,绘制浓度 vs. 吸光度曲线;3. 测量步骤:将样品置于比色皿中,在特定波长(如 280 nm 用于蛋白质)下读取吸光度值;4. 计算浓度:基于 Beer-Lambert 定律,从标准曲线或公式 A = εlc 推算样品浓度;5. 验证与重复:进行平行实验和空白对照,确保结果准确(相对标准偏差 RSD < 5%)。常见方法包括直接测量法或衍生化法,以提高灵敏度。
检测标准包括国际、国家和行业规范,以确保方法一致性和结果可比性。主要标准有:1. 国际标准:如 ISO 7887:2011(水质检测中 UV-Vis 法测定 COD)、ISO 10703:2007(放射性核素分析);2. 国家标准:如中国药典(ChP)中药物含量测定方法、GB/T 5750-2023(生活饮用水标准检验);3. 行业标准:如 AOAC(国际分析化学家协会)对食品添加剂检测规范。这些标准要求仪器校准(如波长精度 ±1 nm)、样品处理(如过滤除杂)和报告格式(包括不确定度评估),以确保检测数据可靠。
证书编号:241520345370
证书编号:CNAS L22006
证书编号:ISO9001-2024001
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