白细胞直方图或散点图检测概述
白细胞直方图或散点图检测是现代血液分析仪进行全血细胞计数（CBC）尤其是白细胞分类计数（WBC Differential）的核心分析技术之一。它并非直接检测单一项目，而是通过对白细胞群体物理或化学特性的综合分析，生成直观的图形化报告，为白细胞分类计数和异常细胞识别提供依据。传统的人工显微镜镜检费时费力且主观性强，而基于直方图或散点图的自动化分析则大大提高了检测效率和标准化程度。该检测通过对白细胞体积（体积法）、细胞内部复杂度（射频法）、核酸含量、细胞膜抗原（荧光染色结合流式细胞术）等不同参数的测量，将不同类别的白细胞（如中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞）以及可能的异常细胞（如原始细胞、异型淋巴细胞等）在二维或三维空间上进行区分和定位。
检测项目
白细胞直方图/散点图本身是仪器分析过程的图形化体现，其核心目的是提供以下信息：
1. 白细胞分类计数： 定量报告各类白细胞（中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞）的百分率和绝对值。
2. 白细胞形态学提示： 识别和提示可能存在的异常细胞群体或形态学改变，如：
• 原始细胞/幼稚细胞区（Blast/Immature Granulocyte Area）
• 异型淋巴细胞（Atypical Lymphocytes）
• 巨大血小板或血小板聚集对白细胞计数的干扰
• 有核红细胞（Nucleated Red Blood Cells, NRBC）的存在
• 未溶解的红细胞或红细胞碎片干扰
• 嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞增多
• 单核细胞增多
3. 报警信息： 当图形分布异常或出现异常细胞群时，仪器会触发相应的报警（Flags），提示检验人员需要进一步进行人工镜检复核。
检测仪器
生成白细胞直方图或散点图主要依赖于各种类型的自动化血液分析仪：
1. 基于电阻抗原理（库尔特原理）： 主要生成白细胞体积分布直方图（Volume Distribution Histogram）。仪器通过测量白细胞通过小孔时引起的电阻变化（与细胞体积成正比）来区分细胞。通常只能提供三分类结果（淋巴细胞、中间细胞/单核细胞、粒细胞）。
2. 基于流式细胞术结合细胞化学染色/荧光染色： 这是目前主流高端血液分析仪采用的技术，可生成复杂的散点图（Scatter Plots）。仪器利用：
• 光散射： 前向散射光（Forward Scatter, FSC）反映细胞大小/体积；侧向散射光（Side Scatter, SSC）反映细胞内部颗粒性/复杂度/核型。
• 荧光信号： 使用特异性荧光染料（如对核酸染色的荧光染料，或结合细胞膜抗原的荧光标记抗体）测量细胞内DNA/RNA含量或特定表面标志物。
通过组合不同的参数（如SSC vs FSC, 荧光强度 vs SSC, 多色荧光组合等），可以在二维或三维散点图上清晰区分五类白细胞，并能更敏感地识别异常细胞。常见的参数组合包括：
• 过氧化物酶通道
• 嗜碱性粒细胞通道
• 核酸荧光通道
• 淋巴细胞亚群通道
代表品牌： 希森美康（Sysmex）的XN/XN-L系列、XE/XT系列；贝克曼库尔特（Beckman Coulter）的DxH系列；西门子医疗（Siemens Healthineers）的Atellica系列、Advia系列；迈瑞（Mindray）的BC系列；雅培（Abbott）的CELL-DYN Sapphire等。
检测方法
白细胞直方图/散点图的生成过程如下：
1. 样本前处理： 全血标本与特定的溶血剂、稀释液和/或染色液在仪器内部或预分析模块中混合。溶血剂选择性溶解红细胞和血小板（部分仪器有血小板鞘流设计避免干扰），并作用于白细胞膜使其部分通透以便染料进入。
2. 细胞测量：
• 电阻抗法： 处理后的细胞悬液流经一个带小孔的传感区。细胞通过小孔时产生与其体积成正比的电阻脉冲信号。
• 流式细胞术法： 细胞在鞘液包裹下单行流经流动池的检测点（激光照射区）。仪器检测细胞产生的散射光信号（FSC, SSC）和/或荧光信号。
3. 信号处理与绘图： 仪器将检测到的每个细胞的电信号或光信号转换为数字信号。根据设定的参数（如体积大小、散射光强度、荧光强度），将每个细胞在二维坐标图（直方图或散点图）上进行定位。一个点代表一个（或一类）细胞。
4. 数据分析与分类： 仪器内置的复杂算法（基于大量正常和异常样本建立的数据库和分类规则）分析图形上细胞的分布特征，识别不同的细胞群簇，计算各类细胞的百分比和绝对值。
5. 结果审核与报警： 仪器根据预设规则判断图形是否正常、是否符合特定模式、是否存在异常细胞群或干扰因素，并据此发出报警信息，提示检验人员进行复核。
检测标准
白细胞直方图/散点图检测的质量控制和标准化至关重要，主要依据以下标准和规范：
1. 国际临床血液学标准化委员会（ICSH）指南： ICSH发布的指南（如关于自动化血液分析仪的性能评价、参考方法等）是行业的重要参考。
2. 临床和实验室标准协会（CLSI）文件： 关键文件包括：
• H20-A2: Reference Leukocyte (WBC) Differential Count (Proportional) and Evaluation of Instrumental Methods: 提供了评估自动白细胞分类计数系统准确性的参考方法和程序。
• H26-A2: Validation, Verification, and Quality Assurance of Automated Hematology Analyzers: 规定了自动化血液分析仪（包括白细胞分类）的安装验证、性能验证和持续质量保证的要求。
• EP系列文件 (如EP05, EP09, EP15)： 关于精密度、方法学比对、用户质控程序等的标准。
3. 实验室内部质量控制和室间质量评价（EQA）/能力验证（PT）：
• 每日使用配套质控品进行室内质控，监控仪器的精密度和稳定性，确保直方图/散点图模式在控。
• 定期参加权威机构组织的EQA/PT计划，评估实验室白细胞分类计数结果的准确性和与其他实验室的一致性。
4. 仪器制造商说明书和性能规范： 遵循制造商提供的操作手册、维护程序、性能规格（精密度、携带污染率、线性范围、可比性、参考区间等）和报警规则设置建议。
5. 复检规则（Reflex Testing Rules）： 遵循国际血液学复检专家组共识（如ISLH共识）或实验室根据自身情况制定的复检规则。这些规则明确规定了哪些异常的直方图/散点图模式、报警信息或定量结果阈值必须触发人工显微镜镜检复核，以确保结果的准确性和可靠性。
6. 标准化操作程序（SOP）： 实验室必须建立详细的SOP，涵盖标本采集、运输、处理、
