细胞STR检测

细胞STR检测以人类基因组短串联重复序列为核心靶标，用于明确体外培养细胞的种属来源与个体身份，识别交叉污染及错误标识。检测流程覆盖STR位点选择、样本采集与送检、PCR扩增、毛细管电泳分离、等位基因分型与数据库比对等环节，并依据灵敏度与重复性指标评价方法性能。该项检测是细胞库质控、细胞治疗产品放行及科研数据可信度验证的关键技术手段，可为实验细胞身份确认提供客观的分型证据。

STR检测原理与位点

短串联重复序列（STR）是基因组中由3～7个碱基为单位串联重复构成的遗传标记，重复次数在个体间存在差异，构成高度多态性。STR检测即针对一组经国际协作确定的Core位点进行扩增分析，位点组合涵盖多个四核苷酸重复区域，同时纳入Amelogenin性别基因作为辅助判别标记。多点位联合分析可使个体识别能力达到接近唯一的水平。由于位点序列短、扩增片段长度适中，STR技术对部分降解的DNA模板仍保持较好的耐受性，适用于培养细胞、冻存样品等多种来源的基因组分析。

样本类型与送检要求

常规可检测样本培养细胞悬液、细胞沉淀、冻存细胞、组织块及提取后的基因组DNA。送检时应保证细胞数量达到方法学的最低要求，一般以活细胞计数为准。样本采集须遵循无菌操作，避免外源人类DNA污染。培养细胞应去除培养液并经缓冲液洗涤，以剔除血清等干扰成分。运输环节依据样本形态选择对应条件：DNA溶液可常温短暂运输，细胞样本宜冷藏或干冰寄送。送检单需注明细胞名称、传代次数、培养条件及疑似污染情况，供实验室设计针对性检测方案与结果解读。

PCR扩增与毛细管电泳法

检测采用多重PCR技术，即在同一反应体系中以荧光标记引物同步扩增多个STR位点。扩增程序经退火温度与循环数优化，以保证各位点扩增均衡。每次扩增均设置阴性对照与阳性参照，用于监控污染与扩增效率。扩增产物经毛细管电泳分离：荧光标记片段在聚合物筛分介质中按片段长度迁移，激光诱导荧光检测器记录各片段的荧光信号与出峰时间。内分子量标准物与样本同步电泳，据此将迁移时间换算为片段长度。该组合方法实现了扩增、分离与信号记录的自动化衔接。

等位基因分型与数据比对

分型软件依据片段长度与荧光颜色，将电泳图谱中的峰归属于对应位点，并以重复次数表示等位基因型别。纯合子表现为单峰，杂合子表现为两条等位基因峰，峰高与峰面积的均衡性用于评估扩增质量。分型完成后，将所得图谱与参考细胞STR数据库进行比对：匹配度高的判定为对应细胞株；出现额外等位基因峰提示可能存在交叉污染或混合细胞群体。比对结果以匹配百分比或共享等位基因数目呈现，并附图谱、分型表与比对结论，构成完整的细胞身份鉴定报告。

灵敏度与重复性指标

方法性能评价围绕检出限、最低模板投入量及位点检出均衡性展开。灵敏度指在保证全部位点获得可信分型的前提下，方法可检出的最低DNA量或最低细胞数。重复性考察同一样本批内重复与批间重复，要求核心位点分型结果一致、峰高比处于可接受区间。实验室还需以标准参照物验证等位基因判读的准确性，并通过 stutter 峰识别规则区分真实等位基因与扩增滑移伪峰。上述指标共同构成检测体系质量控制的基础，也是结果可信度的直接评价维度。

应用场景与判定标准

STR检测适用于细胞库入库鉴定、细胞治疗产品生产过程中的身份确认、科研论文投稿前的细胞溯源，以及疑似交叉污染的排查。判定遵循通行规则：受检细胞分型与参考图谱完全匹配，判定为该细胞株；主分型之外出现低比例额外峰，需结合峰高比例判断为污染或微卫星不稳定性；与数据库无匹配且含人源性位点信号，提示细胞身份错误或为未登记个体来源。小鼠等啮齿类细胞可通过种属特异性位点组合验证，据此排除人鼠杂交或错误标识情形。

关于我们

合作客户