大肠杆菌/大肠埃希氏菌检测
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发布时间:2025-04-23 20:36:16 更新时间:2025-04-22 20:36:19
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作者:中科光析科学技术研究所检测中心
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大肠杆菌(Escherichia coli,简称E. coli)是环境中常见的革兰氏阴性杆菌,广泛存在于人类和动物的肠道中。大多数大肠杆菌菌株对人体无害,但某些致病性菌株(如O157:H7)可引发严重疾病,包括腹泻、尿路感染甚至败血症。因此,在食品、饮用水、医疗环境及公共卫生领域,大肠杆菌的检测是评估卫生状况和防控食源性疾病的关键环节。其检测结果不仅反映样品的微生物污染风险,也是判断消毒效果的重要指标。
1. 大肠杆菌总数测定:评估样品中活菌数量,常用于食品和水质卫生监控。
2. 致病型大肠杆菌检测:特异性检测产肠毒素(ETEC)、肠出血性(EHEC)等致病亚型。
3. 耐热性大肠菌群检测:通过耐热性试验区分环境来源与粪便污染。
4. 抗生素敏感性测试:评估临床分离株的耐药性,指导治疗方案。
5. 基因型检测:通过毒力基因(如stx1、stx2)鉴定致病性。
1. PCR仪:用于扩增目标DNA,快速鉴定致病基因。
2. 荧光显微镜:观察荧光标记的抗体或核酸探针信号。
3. 微生物培养箱:提供恒温环境进行菌落培养。
4. 酶标仪(ELISA):检测毒素或抗原的免疫学反应。
5. 电泳仪:分析PCR产物或质粒图谱。
1. 传统培养法:
- 步骤:选择性培养基(如麦康凯琼脂)分离→生化试验(IMViC)确认→血清学鉴定。
- 优点:准确性高,成本低;缺点:耗时(24-72小时)。
2. 分子生物学方法:
- 实时荧光定量PCR:定量检测特定毒力基因。
- 全基因组测序(WGS):用于溯源和耐药基因分析。
3. 免疫学方法:
- ELISA检测肠毒素或表面抗原。
- 免疫磁珠分离技术(IMS):富集目标菌以提高灵敏度。
4. 快速检测技术:
- 显色培养基:通过菌落颜色变化快速初筛。
- 生物传感器:基于电化学或光学信号实现即时检测。
1. 国际标准:
- ISO 16654:2001(食品中EHEC检测)
- FDA BAM第4章(美国食品中大肠杆菌检测)
2. 中国标准:
- GB 4789.38-2012(食品微生物学检验大肠埃希氏菌计数)
- GB/T 5750.12-2023(生活饮用水标准检验方法)
3. 其他规范:
- EPA Method 1603(水质耐热大肠杆菌检测)
- 药典(如USP <62>)中非无菌产品微生物限度检查。
大肠杆菌/大肠埃希氏菌检测是保障公共卫生安全的核心手段,需根据应用场景选择合适方法。传统培养法仍是金标准,而分子生物学和免疫学技术显著提升了检测效率。遵循国际和行业标准可确保数据的可比性与可靠性,为风险评估和污染溯源提供科学依据。
证书编号:241520345370
证书编号:CNAS L22006
证书编号:ISO9001-2024001
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