二氧化碳测定试剂盒(PEPC酶法)检测
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发布时间:2025-04-25 20:17:36 更新时间:2025-04-24 20:17:37
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作者:中科光析科学技术研究所检测中心
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二氧化碳(CO₂)是生物体内重要的代谢产物和调节因子,其浓度变化与呼吸功能、酸碱平衡及肾脏代谢等生理过程密切相关。在临床诊断、环境监测及生物研究中,准确测定二氧化碳浓度具有重要意义。二氧化碳测定试剂盒(PEPC酶法)是一种基于磷酸烯醇丙酮酸羧化酶(Phosphoenolpyruvate Carboxylase, PEPC)的酶促反应原理开发的检测方法,具有灵敏度高、特异性强、操作简便等特点,广泛应用于血清、血浆及细胞培养液等样本中CO₂含量的测定。
二氧化碳测定试剂盒(PEPC酶法)主要用于定量检测以下场景中的CO₂浓度: 1. 临床医学:评估患者酸碱平衡状态,辅助诊断呼吸性酸中毒/碱中毒、代谢性紊乱等疾病; 2. 生物研究:细胞代谢活性分析、酶动力学研究及微生物培养监测; 3. 环境监测:水体、大气中溶解性CO₂的检测,评估温室气体排放水平。
该检测需依托以下仪器设备完成: 1. 分光光度计:用于测定反应体系在340nm波长处的吸光度变化(NADH依赖型反应); 2. 恒温水浴箱:确保酶促反应在37℃恒温条件下进行; 3. 离心机:处理血液样本时分离血清/血浆; 4. 微量移液器:精确加样,保证检测重复性。
PEPC酶法检测CO₂的核心步骤如下: 1. 样本处理:采集全血样本后离心获取血清或血浆,避免溶血影响检测结果; 2. 试剂配制:按说明书将试剂盒内缓冲液、PEPC酶、NADH等组分混合; 3. 反应体系建立:将样本与试剂按比例混合,启动PEPC催化的羧化反应(CO₂ + PEP → 草酰乙酸); 4. 吸光度测定:通过分光光度计监测NADH在340nm处的吸光度下降,计算CO₂浓度(NADH消耗量与CO₂含量成正比)。
为确保检测结果的准确性与可比性,需遵循以下标准: 1. 国际临床化学联合会(IFCC)指南:规范酶法检测的预分析、分析及后分析流程; 2. CLSI EP05-A3:验证检测系统的精密度与线性范围; 3. ISO 15189:实验室质量管理体系要求,涵盖人员培训、设备校准及质控措施; 4. 试剂盒说明书:严格按厂商提供的操作参数(如反应时间、温度及样本稀释比例)执行。
1. 样本需及时检测或-20℃保存,避免CO₂逸散; 2. 试剂开封后需避光保存,避免反复冻融导致酶活性下降; 3. 每批次检测需同步运行标准品和质控样本,确保结果可靠性。
证书编号:241520345370
证书编号:CNAS L22006
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