哥伦比亚血琼脂基础培养基检测
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发布时间:2025-04-25 21:34:22 更新时间:2025-05-13 19:58:43
点击:0
作者:中科光析科学技术研究所检测中心



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哥伦比亚血琼脂基础培养基(Columbia Blood Agar Base)是一种广泛应用于临床和微生物学实验室的富营养培养基,主要用于分离和培养苛养性细菌(如链球菌、肺炎球菌等)及部分厌氧菌。其基础成分包含酪蛋白胨、动物组织消化物、酵母提取物等,通常添加5%-10%的脱纤维羊血或马血以提供必要的生长因子。为确保培养基的质量和性能符合实验要求,需对其理化性质、无菌性、生长支持能力等关键指标进行系统检测。
哥伦比亚血琼脂基础培养基的主要检测项目包括: 1. pH值:标准范围通常为7.3±0.2,直接影响细菌生长; 2. 无菌性检测:验证培养基灭菌后无微生物污染; 3. 生长性能测试:通过接种标准菌株(如金黄色葡萄球菌ATCC 25923、肺炎链球菌ATCC 49619等)评估菌落形态、大小及溶血特征; 4. 培养基均一性:检查是否存在沉淀或分层现象; 5. 水分含量(针对干粉培养基):控制吸湿性对保存期限的影响。
主要使用的检测设备包括: - pH计:精确测量培养基溶液pH值; - 生化培养箱:提供35-37℃恒温培养条件; - 生物安全柜:确保无菌操作环境; - 分光光度计:用于比浊法评估菌液浓度; - 高压灭菌锅:验证灭菌效果。 关键试剂包括标准菌株、脱纤维动物血液、无菌生理盐水等。
1. pH检测:将培养基溶解后冷却至25℃,使用校准后的pH计直接测定; 2. 无菌试验:随机抽取3%-5%的成品培养基,37℃培养48小时,观察是否出现浑浊或菌落; 3. 生长性能验证: - 稀释标准菌株至0.5麦氏单位,划线接种; - 观察24-48小时内菌落形态、溶血环清晰度及生长密度; 4. 物理性状检查:倾倒平板后观察表面光滑度、颜色均一度及有无结晶析出。
检测需参照以下标准: - 中国药典(2020年版)通则1105“培养基适用性检查”; - ISO 11133:2014《微生物学培养基制备、生产、储存和性能测试》; - CLSI M22-A3文件对培养基质量控制的要求。 合格标准为:目标菌株生长良好(菌落数≥100 CFU/平板),抑制菌不生长,pH值在标称范围内,无菌试验阴性。
检测过程中需重点关注: - 标准菌株的传代次数(≤5代); - 血液添加温度(45-50℃避免溶血); - 培养基配制后的使用期限(通常2-4周,2-8℃避光保存); - 每批次检测需同步进行阳性和阴性对照。
哥伦比亚血琼脂基础培养基的检测是确保临床微生物鉴定结果准确性的关键环节。通过规范化的项目设置、仪器校准和方法验证,可有效控制培养基质量,降低假阴性/假阳性风险,为病原菌分离提供可靠支持。
证书编号:241520345370
证书编号:CNAS L22006
证书编号:ISO9001-2024001
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