基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪检测
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发布时间:2025-05-08 10:59:08 更新时间:2025-06-09 21:00:04
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作者:中科光析科学技术研究所检测中心
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基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪(Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization Time-of-Flight Mass Spectrometry,MALDI-TOF MS)是一种高效、灵敏的质谱分析技术,广泛应用于生物大分子(如蛋白质、核酸、多糖等)的检测与表征。其核心原理是通过基质辅助激光解吸电离技术将样品分子转化为气态离子,再利用飞行时间质量分析器根据离子的质荷比(m/z)进行分离和检测。该技术具有高通量、高分辨率、样品需求量少等优势,尤其在蛋白质组学、微生物鉴定、临床诊断等领域发挥了重要作用。
MALDI-TOF MS的主要检测项目包括: 1. 蛋白质与多肽分析:用于蛋白质鉴定、翻译后修饰分析及定量研究,如疾病标志物筛选。 2. 微生物鉴定:快速鉴定细菌、真菌等病原微生物,应用于临床感染诊断和食品安全检测。 3. 核酸分析:检测DNA/RNA片段、寡核苷酸及核酸修饰产物。 4. 高分子聚合物表征:如合成聚合物分子量分布分析。 5. 药物代谢研究:监测药物分子及其代谢产物的分布与结构变化。
MALDI-TOF MS的核心仪器由以下部分组成: 1. 基质辅助系统:提供能量吸收基质(如α-氰基-4-羟基肉桂酸),促进样品分子电离。 2. 激光器:通常为紫外或红外脉冲激光,用于激发基质与样品分子。 3. 离子源:将激光解吸的分子电离为带电离子。 4. 飞行时间质量分析器(TOF):通过离子飞行时间计算质荷比。 5. 检测器:记录离子信号并转化为质谱图。
MALDI-TOF MS的典型检测流程包括: 1. 样品制备:将待测物与基质混合,形成共结晶。 2. 基质选择:根据样品性质选择合适基质(如DHB用于糖类,SA用于蛋白质)。 3. 点样与结晶:将混合液点在靶板上,干燥形成均匀结晶层。 4. 质谱分析:激光轰击样品点,电离分子并记录飞行时间数据。 5. 数据处理:通过软件解析质谱峰,比对数据库完成定性或定量分析。
为确保检测结果的准确性和可比性,MALDI-TOF MS需遵循以下标准: 1. ISO 16140系列:针对微生物鉴定的方法验证标准。 2. CLSI M58:临床微生物质谱鉴定的操作指南。 3. 蛋白质分析标准:如采用肽质量指纹图谱(PMF)时需符合国际蛋白质组学协会(HUPO)的规范。 4. 仪器校准标准:定期使用标准品(如胰岛素、细胞色素C)校准质谱仪。 5. 数据报告标准:要求标注检测限(LOD)、精密度及数据库版本等信息。
MALDI-TOF MS凭借其快速、灵敏的特点,已成为生命科学和临床医学领域不可或缺的分析工具。通过标准化的检测流程与严格的质量控制,该技术能够实现从微生物鉴定到复杂生物分子表征的多样化需求,未来在精准医疗和即时检测(POCT)中具有更广阔的应用前景。
证书编号:241520345370
证书编号:CNAS L22006
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