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生育酚检测

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发布时间：2025-03-12 15:30:58 更新时间：2025-03-11 15:33:00

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作者：中科光析科学技术研究所检测中心

生育酚（维生素E，包括α、β、γ、δ四种异构体）的检测需围绕 定量分析、异构体鉴别及稳定性评估 等核心指标展开，适用于食品、保健品、医药及化妆品等领域。以下是基于 GB 5009.82-2016（食品中维生素E的测定）、AOAC 992.03（HPLC法） 及 USP<2021>（药典方法） 的系统化检测方案：

一、检测方法与标准

检测方法	适用场景	关键参数	标准依据
HPLC-UV/FLD法	食品、保健品中总生育酚定量	色谱柱：C18（5μm, 250×4.6mm）	GB 5009.82-2016
GC-FID法	油脂基质中α-生育酚检测	衍生化（硅烷化），内标法（三甲基硅烷）	AOAC 992.03
LC-MS/MS法	痕量检测（血浆、药品）	质谱参数：MRM模式（α-生育酚 m/z 430.4→165.1）	USP<2021>
DSPE（分散固相萃取）	复杂基质前处理	吸附剂：C18/PSA（去除色素、脂肪酸）	QuEChERS方法改进

二、检测流程（以HPLC-UV法为例）

1. 样品前处理

油脂样品（如植物油）：
1. 皂化：1g样品+10mL乙醇+2mL 10%抗坏血酸+1mL KOH（50%），80℃水浴30min；
2. 萃取：加入10mL正己烷，离心取上清液，氮吹浓缩至干，甲醇定容。
固体样品（如胶囊）：研磨后直接以正己烷-异丙醇（9:1）超声提取，离心过滤。

2. 色谱条件

流动相：甲醇-水（98:2，v/v）；
流速：1.0mL/min；
检测波长：292nm（UV检测器）；
柱温：30℃；
进样量：20μL。

3. 标准曲线与定量

标准品：α-生育酚（纯度≥98%），浓度梯度0.5~50μg/mL；
线性范围：R²≥0.999，检出限（LOD）0.1μg/g，定量限（LOQ）0.3μg/g。

三、异构体鉴别与分离

异构体	保留时间（HPLC）	特征峰比例（GC-MS）
α-生育酚	8.2min	基峰m/z 430（分子离子峰）
β-生育酚	9.5min	m/z 416（M-14，侧链断裂）
γ-生育酚	10.1min	m/z 402（M-28，双键断裂）
δ-生育酚	11.3min	m/z 388（M-42，三键断裂）

四、稳定性与干扰排除

抗氧化处理：
- 样品前处理全程避光，添加0.1% BHT（丁基羟基甲苯）防止氧化。
基质干扰排除：
- 食品：DSPE净化去除色素（PSA吸附剂）；
- 血浆：液液萃取（正己烷-乙醚，6:4）去除蛋白质。

五、检测设备与试剂

设备/试剂	用途	推荐型号/品牌
高效液相色谱仪	生育酚分离与定量	Agilent 1260 Infinity（DAD检测器）
气相色谱-质谱联用仪	异构体鉴别与痕量分析	Thermo Scientific ISQ 7000
氮吹仪	样品浓缩	Organomation N-EVAP 112
α-生育酚标准品	定量校准	Sigma-Aldrich（≥98%，CAS 59-02-9）

六、国际与国内标准限值对比

参数	中国（GB 5009.82）	欧盟（EC 1924/2006）	美国（FDA 21 CFR 101.9）
食品标签标注 α-生育酚当量（mg α-TE）	需标注总维生素E（mg）	按α-生育酚计（mg）
每日摄入量（成人）	14mg α-TE（NRV）	12mg α-TE（RDA）	15mg α-TE（RDI）

七、检测报告与合规性

报告内容：
- 样品类型（食品、药品、化妆品）、基质处理方法；
- 检测数据（总生育酚含量、异构体分布、回收率）；
- 合规性结论（如“符合GB 5009.82-2016要求”）。
认证要求：
- 食品：需符合GB 28050-2011营养标签通则；
- 药品：符合《中国药典》2020年版四部维生素E测定；
- 出口欧盟：需满足EC 1924/2006营养声称法规。