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细胞STR鉴定检测

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发布时间：2025-05-06 10:02:21 更新时间：2025-05-13 20:42:13

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作者：中科光析科学技术研究所检测中心

细胞STR鉴定检测的重要性和背景介绍

细胞STR（Short Tandem Repeat）鉴定检测是现代生物医学研究和生物制药领域中的一项关键质量控制技术。随着细胞治疗、疫苗研发和生物制剂生产的快速发展，细胞系的身份验证和交叉污染检测变得尤为重要。STR检测通过分析细胞基因组中特定的短串联重复序列，为细胞系提供独特的"遗传指纹"。这项技术在以下几个方面具有突出价值：确保实验数据的可重复性、防止实验室间细胞系错误识别、验证细胞系的遗传稳定性，以及在细胞治疗产品生产中保证产品的一致性和安全性。特别是在肿瘤研究、干细胞应用和生物制药领域，STR鉴定已成为国际公认的细胞身份验证金标准，被各大科研期刊、监管机构和制药公司广泛要求。

具体的检测项目和范围

细胞STR鉴定检测主要包含以下核心项目：1) 核心STR位点检测（通常包括8-23个国际标准位点）；2) 性别染色体标记检测（Amelogenin基因）；3) 细胞系特异性SNP检测（可选）；4) 细胞纯度评估（检测是否存在混合细胞群）。检测范围涵盖各类人类源细胞系，包括但不限于肿瘤细胞系（如HEK293、HeLa）、干细胞系（hESC、iPSC）、原代细胞及其衍生细胞系。检测可应用于细胞库建立、细胞治疗产品生产、科研用细胞验证等多个场景。

使用的检测仪器和设备

标准STR鉴定检测需要以下专业设备：1) 核酸提取系统（如QIAcube或MagNA Pure）；2) PCR扩增仪（如GeneAmp PCR System 9700）；3) 毛细管电泳系统（如ABI 3500xL Genetic Analyzer）；4) 荧光检测分析系统；5) 生物分析仪（如Agilent 2100，用于DNA质量评估）。其中，毛细管电泳系统是STR分型的核心设备，配合专用荧光标记引物和Size Standard，可实现高分辨率STR片段分析。现代实验室还常配备自动化液体处理工作站以提高检测通量和一致性。

标准检测方法和流程

标准STR鉴定检测流程包括以下步骤：1) 细胞样本采集与DNA提取（采用硅胶膜柱法或磁珠法）；2) DNA质量与浓度检测（满足OD260/280比值1.7-2.0，总量≥5ng）；3) PCR扩增（使用商业试剂盒如AmpFLSTR Identifiler Plus，95℃变性后30-32个循环）；4) PCR产物纯化与稀释；5) 毛细管电泳分离与荧光检测；6) 数据分析与解读（使用GeneMapper ID-X等专业软件）。整个过程需设置阳性对照（标准细胞系DNA）和阴性对照（无模板对照），严格防止污染。典型检测周期为2-3个工作日。

检测结果的评判标准

STR鉴定结果的评判依据以下标准：1) 匹配度（与参考数据库比较，≥80%匹配判定为同一细胞系）；2) 等位基因频率（稀有等位基因需特别标注）；3) 峰高平衡性（主峰与次峰比应在60%-140%之间）；4) 杂合子丢失评估（LOH需记录）；5) 交叉污染指标（出现额外等位基因峰提示污染）。对于科研用途，≥80%STR位点匹配即可接受；而GMP环境下要求≥95%匹配，且不得出现非预期等位基因。最终报告应包含STR分型图谱、匹配度数据和质量控制参数，并由授权人员审核签发。