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对虾白斑病检疫检测

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发布时间：2025-05-14 04:59:04 更新时间：2025-05-13 21:44:13

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作者：中科光析科学技术研究所检测中心

对虾白斑病检疫检测的重要性

对虾白斑病（White Spot Syndrome, WSS）是由白斑综合征病毒（WSSV）引起的一种高致病性、高致死率的传染性疾病，主要感染养殖对虾、蟹类等甲壳类动物。该病传播速度快，感染后死亡率可高达80%-100%，对全球水产养殖业造成巨大经济损失。因此，开展对虾白斑病的检疫检测成为保障养殖安全、阻断疫情扩散的关键环节。通过科学、精准的检测手段，能够早期发现病原、及时隔离感染个体，为防控措施的制定提供依据，同时助力国际贸易中病害风险管控。

检测项目与核心内容

对虾白斑病检疫检测主要包括以下项目：
1. 临床症状观察：检测对虾体表是否出现直径0.5-2.0 mm的白色斑点，甲壳易剥离或出现发红现象；
2. 病原体检测：通过分子生物学或免疫学方法直接检测WSSV的存在；
3. 组织病理学分析：观察鳃、胃、肝胰腺等组织的细胞核病变特征；
4. 环境风险评估：检测养殖水体、饵料等潜在传播媒介的病毒携带情况。

常用检测仪器与设备

针对不同检测方法，需配备以下关键仪器：
- PCR仪：用于病毒DNA的扩增与检测；
- 实时荧光定量PCR仪：实现病毒载量的精确定量；
- 电子显微镜：观察病毒粒子形态（杆状，直径70-150 nm）；
- 酶标仪：配合ELISA试剂盒进行抗体检测；
- 核酸提取仪：快速提取样本中的病毒核酸；
- 组织切片机：用于病理学样本制备。

主要检测方法及流程

1. 分子生物学检测法：
- 巢式PCR法：采用WSSV特异性引物（如VP28基因靶点），通过两轮扩增提高灵敏度；
- 实时荧光定量PCR：可检测低至10拷贝/μL的病毒DNA，实现定量分析；
- LAMP法：无需复杂设备，适合现场快速检测。
2. 免疫学检测法：
- 单克隆抗体ELISA：检测病毒抗原，灵敏度达1 ng/mL；
- 免疫层析试纸条：15分钟内完成现场初筛。
3. 病理学检测法：
- 石蜡切片H&E染色：观察细胞核肿大、嗜碱性包涵体等特征病变；
- 电镜观察：直接确认病毒粒子形态。

国际与国内检测标准

1. 国际标准：
- OIE《水生动物疾病诊断手册》第11章（2023版）规定的WSSV检测规程；
- ISO/TS 15216-2:2019 水产病原分子检测通用要求。
2. 国内标准：
- GB/T 15805.5-2018《对虾白斑综合征病毒检测规程》；
- SN/T 1152-2020《进出口水生动物WSSV检疫技术规范》；
- NY/T 2970-2016《对虾疫病监测技术规范》。

检测结果判定与报告

依据标准要求，检测结果需满足：
- PCR检测：阳性样本需在预期位置出现特异性条带（如144 bp、941 bp）；
- 实时PCR：Ct值≤35且扩增曲线呈典型S型；
- ELISA：样本OD值与阴性对照比值（P/N）≥2.1判为阳性。
最终报告需包含检测方法、仪器型号、标准依据及结论，由授权签字人审核签发。