斑节对虾杆状病毒病(MBV)检疫检测
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发布时间:2025-05-14 05:16:11 更新时间:2025-05-13 05:16:14
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作者:中科光析科学技术研究所检测中心
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斑节对虾杆状病毒病(Monodon Baculovirus Disease, MBV)是一种严重危害斑节对虾(Penaeus monodon)的病毒性疾病,主要感染幼虾和成虾的中肠腺表皮细胞,导致摄食减少、生长停滞、死亡率升高等问题。该病毒通过垂直传播(亲虾携带)或水平传播(污染水体、饲料等)扩散,对全球对虾养殖业造成巨大经济损失。由于其潜伏期长、感染初期症状不明显,检疫检测成为防控MBV传播的关键手段。目前,国际动物卫生组织(OIE)将其列为须申报的水生动物疫病,各国均制定了严格的检疫标准和检测流程。
MBV检疫检测的核心项目包括:
1. 病毒核酸检测:通过分子生物学方法检测病毒DNA;
2. 病理组织学检查:观察中肠腺细胞的核内包涵体;
3. 病毒分离培养:利用对虾细胞系或活体进行病毒扩增;
4. 免疫学检测:采用ELISA或免疫荧光技术检测病毒蛋白抗原。
主要使用的仪器设备包括:
- PCR仪(用于核酸扩增);
- 荧光显微镜(观察病理切片和免疫荧光标记);
- 超高速离心机(病毒颗粒富集);
- 电泳系统(核酸片段分析);
- 电子显微镜(直接观察病毒形态)。
1. 分子生物学检测
采用PCR技术(如巢式PCR、实时荧光定量PCR)扩增MBV特异性基因片段(如DNA聚合酶基因),灵敏度可达1-10个病毒拷贝。
2. 病理学检测
制备中肠腺组织切片,经H&E染色后观察核内嗜碱性包涵体,结合电镜确认杆状病毒颗粒。
3. 免疫学方法
利用单克隆抗体通过dot-blot ELISA或免疫组化技术检测病毒抗原,适用于大规模筛查。
国际与国内主要标准包括:
- OIE《水生动物卫生法典》:规定MBV检测需结合组织病理学和分子生物学方法;
- 中国国家标准GB/T 34748-2017:明确PCR检测的操作规范及判定阈值;
- SN/T 1675-2019:进出口对虾中MBV的检疫技术标准,涵盖采样、检测及结果判定全流程。
检测结果需满足敏感性≥95%、特异性≥98%的技术要求,阳性样本需经实验室复核确认。
证书编号:241520345370
证书编号:CNAS L22006
证书编号:ISO9001-2024001
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