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真鲷虹彩病毒核酸检测

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发布时间：2025-05-16 00:41:56 更新时间：2025-05-15 00:41:57

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作者：中科光析科学技术研究所检测中心

真鲷虹彩病毒核酸检测的重要性

真鲷虹彩病毒（Red Sea Bream Iridovirus, RSIV）是一种严重危害海水鱼类养殖的病原体，主要感染真鲷、石斑鱼、鲈鱼等高经济价值鱼类，可导致幼鱼大规模死亡和成鱼免疫力下降。由于其传播速度快、致死率高，病毒核酸检测已成为水产养殖业病害防控的核心环节。通过精准的分子检测技术，能够早期发现感染个体，及时隔离并采取防控措施，从而减少经济损失，保障水产品安全供应。

检测项目及目标

真鲷虹彩病毒核酸检测的主要目标是针对病毒特异性基因片段（如ATP酶基因或MCP基因）进行定性或定量分析。检测项目涵盖以下内容：
1. 病毒DNA提取：从鱼体组织（脾脏、肾脏、鳃等）或水样中分离病毒核酸。
2. 靶基因扩增：通过PCR技术特异性扩增病毒基因片段。
3. 结果分析：判断样本中病毒载量及感染状态，为疫病预警提供依据。

主要检测仪器

实现高灵敏度检测需依赖专业设备，包括：
- 实时荧光定量PCR仪（qPCR）：用于病毒DNA的定量检测，支持动态监测扩增过程。
- 核酸提取仪：自动化完成样本中DNA/RNA的纯化，提高检测效率。
- 凝胶成像系统：验证常规PCR产物的特异性条带。
- 超低温冰箱（-80℃）：保存病毒核酸及试剂，确保样本稳定性。

检测方法与技术流程

目前主流的检测方法包括：
1. 常规PCR法：利用特异性引物扩增病毒DNA，通过电泳分析结果，灵敏度约为10³ copies/μL。
2. 实时荧光定量PCR（qPCR）：采用TaqMan探针技术，可检测低至10 copies/μL的病毒，并实现定量分析。
3. 环介导等温扩增法（LAMP）：在恒温条件下快速完成扩增，适合现场快速筛查，灵敏度与qPCR相当。

检测标准与规范

国内外相关机构制定了严格的检测标准：
- 中国农业部标准（SC/T 7232-2020）：明确规定了真鲷虹彩病毒的PCR检测方法及判定阈值。
- OIE手册：世界动物卫生组织推荐使用qPCR作为国际贸易中的标准检测方法。
- 实验室质量控制：要求每批次检测需设置阴性对照、阳性对照和空白对照，确保结果可靠性。