伪狂犬病病毒核酸检测
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发布时间:2025-05-16 03:32:18 更新时间:2025-05-15 03:32:20
点击:0
作者:中科光析科学技术研究所检测中心
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伪狂犬病(Pseudorabies,PR)是由伪狂犬病病毒(Pseudorabies Virus, PRV)引起的一种急性、高度接触性传染病,主要感染猪、犬、猫等多种动物,并可通过直接接触或污染物间接传播。近年来,随着我国养猪业规模化发展,PRV的防控成为保障生猪健康生产的核心环节之一。核酸检测作为早期诊断、疫情监测和病毒溯源的关键技术,具有灵敏度高、特异性强、检测周期短等优势,已成为伪狂犬病病毒检测的首选方法。
伪狂犬病病毒核酸检测的核心项目包括:1)病毒核酸的定性检测(确定样本中是否含有PRV基因);2)病毒基因分型(区分野毒株与疫苗株);3)病毒载量定量分析(评估感染严重程度);4)基因突变监测(跟踪病毒变异趋势)。检测样本通常为病畜的鼻拭子、脑组织、流产胎儿组织或血液等,目标基因为PRV的gB、gE、gC等高度保守的基因区域。
1. 实时荧光定量PCR仪:用于病毒核酸的快速扩增与实时检测,支持绝对定量分析;
2. 核酸提取仪:自动化完成样本中病毒RNA/DNA的分离纯化;
3. 电泳系统:验证PCR产物大小及特异性;
4. 测序仪:用于病毒基因序列分析与分型研究。
1. 实时荧光定量PCR(qPCR):基于TaqMan探针或SYBR Green染料法,通过荧光信号变化实时监测扩增过程,检测限可达101-102 copies/μL;
2. 普通PCR结合电泳分析:扩增后通过凝胶电泳观察特异性条带,适用于初步筛查;
3. 数字PCR(dPCR):通过微滴分区实现绝对定量,适用于低载量样本检测;
4. 全基因组测序技术:用于病毒进化分析与疫苗株匹配度评估。
我国现行标准主要依据:
1. GB/T 22917-2008《伪狂犬病诊断技术》:规定了病毒分离、PCR检测等方法的操作流程;
2. OIE《陆生动物诊断试验手册》:推荐使用gE基因缺失鉴别PCR区分野毒株与疫苗株;
3. 实验室生物安全要求:核酸检测需在BSL-2及以上实验室进行,防止气溶胶污染;
4. 质量控制标准:每批次检测需包含阳性对照、阴性对照和内参基因,确保结果可靠性。
通过上述检测技术与标准的综合应用,可实现对伪狂犬病病毒的精准检测,为疫情预警、免疫效果评估及净化方案制定提供科学依据。
证书编号:241520345370
证书编号:CNAS L22006
证书编号:ISO9001-2024001
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