引言

志贺菌（Shigella）是一种革兰氏阴性杆菌，属于肠杆菌科，是引起细菌性痢疾（又称志贺菌病）的主要病原体。该疾病通过粪-口途径传播，通常由污染的食物、水源或直接接触感染者粪便引发，临床表现包括剧烈腹泻、腹部绞痛、发热和血便，严重时可导致脱水、休克甚至死亡，尤其在儿童、老年人和免疫缺陷人群中危害极大。据世界卫生组织（WHO）统计，全球每年约有1.6亿例志贺菌感染病例，其中超过100万人死亡，主要发生在卫生条件较差的地区，凸显了其作为全球公共卫生重大威胁的地位。

志贺菌检测在临床诊断、疫情控制、食品安全监控和环境卫生管理中扮演着关键角色。例如，在临床实验室中，早期检测可指导抗生素治疗（如使用环丙沙星或阿奇霉素），避免抗生素滥用；在食品工业中，对生鲜食品、饮用水和加工环境进行定期检测，可预防食源性疾病爆发，遵守法规如HACCP体系；在公共卫生事件中，快速识别志贺菌血清型（如痢疾志贺菌或福氏志贺菌）有助于追踪感染源和制定防控策略。随着分子生物学技术的发展，检测方法日益精准高效，但挑战仍存，如菌株耐药性增加和资源匮乏地区的实施难度，因此建立标准化检测流程至关重要。本文将重点阐述志贺菌检测的核心要素，包括检测项目、仪器设备、方法技术和相关标准，以提供全面参考。

在检测过程中，样本通常来自患者粪便、环境拭子或食品样本，需在生物安全二级（BSL-2）条件下处理，以避免实验室感染。检测的核心目标不仅是确认志贺菌的存在，还包括鉴定其种属、毒力基因和耐药性，为及时干预提供依据。随着全球化和气候变化，志贺菌的传播风险上升，强化检测能力对降低疾病负担具有深远意义。

检测项目

志贺菌检测项目涵盖多个关键环节，旨在全面评估样本中病原体的存在、特性和风险。主要项目包括：样本预处理（如粪便或食品样本的均质化和稀释）、初步筛查（通过显微镜检查或快速抗原测试排除其他病原体）、培养分离（在选择性培养基上分离纯菌株）、生化鉴定（测试菌株的代谢特性，如糖发酵、硫化氢产生和靛基质试验）、血清学分型（使用多价和单价抗血清区分志贺菌的四种血清群：痢疾志贺菌、福氏志贺菌、鲍氏志贺菌和宋内志贺菌）、毒力基因检测（如inv基因的PCR扩增以评估致病性）以及抗生素敏感性测试（通过Kirby-Bauer法或自动化系统测定耐药谱）。这些项目相互衔接，确保检测结果的准确性和可靠性，例如在疫情调查中，血清学分型能帮助识别爆发源，而耐药性测试则指导临床用药方案。

检测仪器

志贺菌检测依赖一系列专业仪器设备，以确保高效、安全的操作。核心仪器包括：恒温培养箱（用于样本在选择性培养基如XLD琼脂或SS琼脂上的孵育，温度通常设定为35-37°C）、生物安全柜（提供BSL-2级防护，防止气溶胶传播）、显微镜（用于革兰染色镜检，初步观察细菌形态）、PCR仪（进行分子生物学检测，如实时荧光PCR扩增志贺菌特异性基因）、酶标仪（配合ELISA试剂盒进行免疫学检测，快速筛查抗原）、自动化鉴定系统（如VITEK 2或MicroScan，集成生化试验和药敏分析）、离心机（样本预处理中的离心分离）以及高压灭菌器（废弃物处理）。现代检测还常用快速检测设备如横向流动试纸条或LAMP设备，适用于现场筛查。这些仪器的选择需符合实验室安全标准，并定期校准以保证精度，例如PCR仪需通过质量控制运行验证扩增效率。

检测方法

志贺菌检测方法分为传统和现代技术，各具优势以适应不同场景。传统方法以培养为基础：首先进行样本富集（在GN肉汤或缓冲蛋白胨水中），然后接种到选择性培养基（如麦康凯或Hektoen琼脂），孵育18-24小时后观察菌落特征（无色透明菌落）；接着进行生化试验（如三糖铁试验和尿素酶试验），最后通过血清凝集试验确认分型。这种方法成本低但耗时长（需2-3天），灵敏度受样本质量影响。现代方法强调速度和特异性：分子生物学方法（如PCR或qPCR）直接检测毒力基因（如ipaH或ial），可在4-6小时内出结果，灵敏度高；免疫学方法（如ELISA或免疫磁珠分离）利用抗体结合抗原，适用于大规模筛查；快速检测试剂盒（如乳胶凝集或侧向层析）提供现场即时结果，但需验证假阳性。综合应用时，实验室常采用“培养+分子”组合法，确保高准确度，尤其在疫情响应中优先使用快速技术。

检测标准

志贺菌检测严格遵循国际和国内标准，以确保结果的可比性和可靠性。主要标准包括：国际标准化组织（ISO）的ISO 21567:2004（食品安全中的志贺菌检测方法，规范样本处理、培养和确认步骤）、美国食品药品管理局（FDA）的Bacteriological Analytical Manual（BAM）Chapter 6a（提供详细实验室规程和验证指南）、中国国家标准GB 4789.5-2016（食品微生物学检验中的志贺菌检验，定义培养基、生化试验和报告要求）以及临床实验室标准协会（CLSI）的M45-A2（抗菌药物敏感性测试指南）。这些标准强调质量控制措施，如使用阳性对照（如ATCC菌株）和阴性对照验证过程，样本检测限设定（通常为10^3-10^5 CFU/g），并规定报告格式（包括菌株鉴定和耐药性数据）。遵守标准不仅能减少误差，还支持全球数据共享，例如在WHO的全球食源性疾病监测网络中，统一标准便于跨境疫情协作。

结语

综上所述，志贺菌检测是一个系统化过程，涉及多样化的项目、仪器、方法和标准，其高效实施对公共卫生和食品安全至关重要。随着技术进步，如全基因组测序的引入，检测正朝着更快速、精准的方向发展，但仍需强化资源分配和人员培训以应对全球挑战。通过标准化流程，检测不仅能及时控制疾病传播，还能为疫苗研发和政策制定提供数据支持。

检测机构资质证书

CMA认证

检验检测机构资质认定证书

证书编号：241520345370

有效期至：2030年4月15日

CNAS认可

实验室认可证书

证书编号：CNAS L22006

有效期至：2030年12月1日

ISO认证

质量管理体系认证证书

证书编号：ISO9001-2024001

有效期至：2027年12月31日

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