禽流感小鼠模型是研究病毒致病力、评价干预措施与免疫应答的核心实验体系。围绕该模型的检测服务覆盖毒株亚型鉴定、品系适配、样本采集规范、病毒载量定量、特异性抗体分析、细胞因子联检、肺组织病理与病毒抗原定位等模块。各模块数据相互印证，可完整还原感染进程，据此判断模型建立状态与干预效果。
禽流感小鼠模型检测概述
禽流感病毒感染小鼠模型检测以“规范采样—多法联用—多指标互证”为主线。小鼠与雪貂均可用于禽流感研究，小鼠因品系齐全、操作便利而应用更广。检测维度涵盖病毒载量动态、抗体应答、炎症因子谱、肺组织病理及病毒抗原分布。各项数据需与未感染对照组比对，进而判断感染是否建立及病变程度。
毒株亚型与小鼠品系选择
毒株亚型决定检测侧重点。高致病性亚型如H5N1、H7N9侧重病毒载量、肺损伤与炎症因子指标；低致病性亚型如H9N2、H7N4及低剂量感染模型关注体重变化与抗体转阳时程。品系方面，BALB/c与ICR小鼠常用，前者适于免疫应答分析，后者对多种毒株敏感性良好。涉及核蛋白CTL表位鉴定时可选用人MHC转基因小鼠。正式实验前宜先经预感染试验确定剂量与品系组合。
感染样本类型与采集规范
检测样本依项目匹配。病毒载量测定取肺组织、鼻洗液及支气管肺泡灌洗液；抗体检测采血清；因子检测用血清与肺匀浆；病理与抗原定位固定肺组织，必要时加取气管、脑与脾脏。采样时点覆盖感染早期、高峰期与恢复期，以绘制动态曲线。肺叶分区处理，一侧提取核酸，另一侧制片，规避交叉污染。血清分离后低温保存，减少冻融。
病毒载量检测——qPCR法
病毒载量定量以荧光定量PCR为主流方法。提取样本病毒RNA并逆转录为cDNA，以针对血凝素、核蛋白或基质基因的引物探针扩增。标准品绘制曲线后，将Ct值换算为拷贝数，完成绝对定量。反应须设阴性与无模板对照，监控污染所致假阳性。多时点采样可绘制动态曲线，用于比较毒株能力或评估药物抑制效果。
ELISA法检测特异性抗体
血清特异性抗体以ELISA法测定。灭活全病毒或重组血凝素蛋白包被酶标板，加入系列稀释的待测血清，经酶标二抗显色后读取吸光度，以此判定转阳并计算终点滴度。亚类检测可区分IgG各亚型及黏膜IgA。每块反应板参照阴性对照独立设定临界值。中和活性可辅以微量中和试验，与ELISA结果互证。
细胞因子联检——多重微球法
高致病性毒株感染常伴细胞因子风暴，血清及肺匀浆中炎症介质水平是模型评价的关键指标。多重微球免疫分析以荧光编码微球区分靶分子，流式原理读取信号，由标准曲线换算浓度，可对IL-6、TNF-α、IFN-γ等因子同步定量，样本用量少、通量高。结果需结合病理评分解读，区分保护性应答与病理性炎症。通路机制研究可同步检测相关蛋白表达。
肺组织病理检测——HE染色
肺组织病理学评价依托苏木素-伊红染色完成。肺叶经固定、脱水、包埋后切片染色。镜下观察支气管上皮损伤、间质性肺炎、肺泡水肿、出血及坏死等病变，按范围与严重程度行半定量评分，由观察者独立盲评后取均值。高致病性毒株以弥漫性肺泡损伤为主，低致病性毒株病变多局限于支气管周围。病理数据与病毒载量、因子谱联合，可完整刻画疾病进程。
病毒抗原定位——免疫组化法
病毒抗原的组织分布借助免疫组化法确定。以核蛋白或血凝素特异性抗体为一抗，与切片中抗原结合后经标记二抗显色，光镜下显示阳性部位。单克隆抗体特异性强、批次一致性好，适用于定位检测。判读关注阳性信号分布与强度，如支气管上皮、肺泡上皮及巨噬细胞的着色。抗原分布区应与HE病变部位对应，据此明确病毒位点与损伤范围。
检测灵敏度与重复性验证
方法学验证涵盖灵敏度、线性范围与重复性。qPCR以标准曲线线性相关性与最低检出限为核心指标；ELISA需验证空白限、检出限及批内批间变异。重复性验证要求同一样本多次检测量值分布集中。免疫组化与病理评分辅以观察者间一致性考核。验证须覆盖血清、肺匀浆、灌洗液等基质，保证各类样本可靠性。
应用场景与结果判定标准
本体系适用于模型建立确认、药物与疫苗效果评价及致病机制研究。中药复方等干预研究以病毒载量下降、体重回升、生存改善及病理评分降低作为疗效判定指标。模型建立成功的判定要点：感染后规律性体重下降，肺内病毒可检出并动态消长，血清抗体转阳，肺组织呈典型病变且抗原定位明确。各项指标须与对照数据综合比对，单一指标不作结论依据。
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