一、检测目的与适用场景

生物素（Biotin，维生素B7/H）是人体必需的水溶性维生素，检测其含量用于：

• 临床诊断：评估生物素缺乏症（如脱发、皮炎、神经系统症状）。
• 营养补充品质量控制：验证保健品、食品中的生物素含量。
• 实验室研究：生物素-亲和素系统在分子生物学中的应用（如ELISA、Western Blot标记）。

核心依据标准：

• 中国标准：
  • GB 5009.259-2023《食品中生物素的测定》
  • WS/T 404-2023《临床生物化学检验常规项目分析质量指标》
• 国际标准：
  • AOAC 2012.13（食品与保健品中生物素的HPLC检测方法）
  • CLSI EP17-A2（临床实验室检测方法验证指南）
  • USP 40-NF 35（美国药典 生物素检测方法）

二、核心检测方法及流程

1. 高效液相色谱法（HPLC）

适用场景：食品、保健品、药品中生物素的定量分析。 步骤：

1. 样品前处理：
   • 食品/药品：研磨后，用磷酸盐缓冲液（pH 6.8）提取，离心过滤。
   • 血清/血浆：乙腈沉淀蛋白，离心取上清液。
2. 色谱条件：
   • 色谱柱：C18反相柱（250mm×4.6mm，5μm）。
   • 流动相：甲醇-磷酸盐缓冲液（20:80，v/v），流速1.0mL/min。
   • 检测器：紫外检测器（波长210nm）。
3. 定量分析：外标法或内标法（如添加维生素B5作内标）。

合格标准：

• 食品/保健品：生物素含量≥标称值的80%（GB 5009.259）。
• 临床血清参考值：0.5-5.0 ng/mL（成人正常范围）。

2. 酶联免疫吸附法（ELISA）

适用场景：临床血清/尿液样本快速检测。 步骤：

1. 样本稀释：血清1:10稀释，尿液直接检测。
2. 操作流程：
   • 包被生物素抗体→加样本→加酶标二抗→显色（TMB底物）→450nm测吸光度。
3. 标准曲线：使用0-50 ng/mL生物素标准品绘制。

注意事项：

• 交叉反应：避免样本中含高浓度链霉亲和素或抗生素（如链霉素）。
• 干扰物质：溶血、脂血样本需预处理（离心过滤）。

3. 微生物法（AOAC 2012.13）

适用场景：复杂基质（如婴儿配方奶粉）中生物素的定量。 原理：利用乳酸菌（Lactobacillus plantarum）对生物素的依赖性生长。 步骤：

1. 样品水解：酸水解（0.1N HCl，121℃ 30分钟）释放结合态生物素。
2. 菌株培养：接种菌液至含样品的培养基，37℃培养24小时。
3. 比浊法测定：600nm测菌液浊度，与标准曲线对比计算含量。

优点：灵敏度高（检测限0.1 ng/g），适合低含量样本。

三、检测设备与试剂

四、常见问题与解决方案

五、临床与生产建议

1. 临床诊断：
   • 生物素缺乏症：血清生物素＜0.2 ng/mL时需补充（剂量30-100 μg/天）。
   • 药物干扰：长期使用抗癫痫药（如丙戊酸）可能降低生物素水平。
2. 保健品生产：
   • 质量控制：每批次检测生物素含量（HPLC法），偏差控制在±10%内。
   • 配方设计：生物素与锌、维生素B5协同增强吸收（如护发类产品）。
3. 实验室研究：
   • 标记优化：生物素化抗体建议摩尔比1:3（抗体:生物素），避免过度标记导致聚集。

通过系统性检测，生物素的含量与活性可精准评估，满足临床诊断、食品监管及科研应用需求。建议优先选择HPLC法（高精度）或ELISA法（快速筛查），并根据样本类型优化前处理流程，确保结果可靠性。

检测机构资质证书

CMA认证

检验检测机构资质认定证书

证书编号：241520345370

有效期至：2030年4月15日

CNAS认可

实验室认可证书

证书编号：CNAS L22006

有效期至：2030年12月1日

ISO认证

质量管理体系认证证书

证书编号：ISO9001-2024001

有效期至：2027年12月31日

关于我们

部分仪器

合作客户