维生素B1检测
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发布时间:2025-04-25 08:52:18 更新时间:2025-04-24 09:11:40
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作者:中科光析科学技术研究所检测中心
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维生素B1(硫胺素)作为人体必需的微量营养素,在能量代谢和神经系统功能中发挥着关键作用。其缺乏会导致严重的健康问题,包括脚气病、韦尼克脑病等典型病症。随着现代人饮食结构的变化和慢性疾病患者的增加,维生素B1检测在临床诊断、营养评估和食品质量控制等领域显示出越来越重要的应用价值。在临床医学中,维生素B1检测可用于评估酒精依赖患者、长期肠外营养患者、慢性消耗性疾病患者以及老年人的营养状况;在食品工业中,该检测是强化食品开发和质量控制的重要环节;在公共卫生领域,维生素B1检测有助于评估人群营养状况并指导营养干预政策的制定。
维生素B1检测主要包括以下项目:1)血清/血浆中硫胺素浓度测定;2)全血中硫胺素焦磷酸(活性形式)含量测定;3)尿液中硫胺素及其代谢产物排泄量检测;4)食品和营养补充剂中硫胺素含量测定。检测样本范围涵盖人体生物样本(血清、血浆、全血、尿液)、各类食品原料及成品(谷物、奶制品、肉制品、营养强化食品等)、药物制剂和膳食补充剂。根据不同的检测目的,可选择总硫胺素测定或活性硫胺素测定,其中活性形式的测定对评估机体维生素B1的功能状态更具临床意义。
现代维生素B1检测主要依赖以下仪器设备:1)高效液相色谱仪(HPLC),配备荧光检测器或紫外检测器,是目前最常用的检测设备;2)液相色谱-质谱联用仪(LC-MS/MS),具有更高的灵敏度和特异性;3)荧光分光光度计,用于传统荧光分析法;4)酶标仪,适用于基于硫胺素依赖性酶的生物检测法;5)全自动生化分析仪,用于临床实验室的大批量样本检测。辅助设备包括离心机、氮吹仪、恒温水浴箱、超声波提取仪等样品前处理设备,以及精密天平、pH计等基本实验室仪器。
维生素B1的标准检测流程包括以下步骤:1)样本采集与保存:血液样本需避光采集并立即分离血浆/血清,-20℃保存;2)样品前处理:采用酸性溶液提取,氧化酶或碱性铁氰化钾将硫胺素氧化为具有荧光特性的硫色素;3)色谱分离:使用C18反相色谱柱,流动相为甲醇-磷酸盐缓冲液系统;4)检测分析:荧光检测器(激发波长365nm,发射波长435nm)或质谱检测;5)定量计算:采用外标法或内标法进行定量分析。不同样本类型的前处理方法有所差异:血清样本需脱蛋白处理;全血样本需酶解释放硫胺素焦磷酸;食品样本需酸水解释放结合态硫胺素。
维生素B1检测需遵循多项技术标准和规范:1)临床实验室标准:CLSI C62-A标准(液相色谱-串联质谱法检测维生素);2)食品检测标准:AOAC 942.23、GB 5009.84-2016(食品中硫胺素的测定);3)药典标准:《中国药典》2020年版四部通则0722维生素B1测定法;4)质量控制标准:ISO 17025实验室管理体系要求。方法学验证需考察线性范围(通常0.5-100ng/mL)、检出限(≤0.2ng/mL)、精密度(RSD<10%)和回收率(85%-115%)等指标。实验室需定期参加能力验证计划,如美国CAP的维生素检测能力验证项目。
维生素B1检测结果的临床评判标准如下:1)血清/血浆总硫胺素:正常范围66-200nmol/L,<66nmol/L提示不足,<30nmol/L为严重缺乏;2)全血硫胺素焦磷酸(活性形式):正常>70nmol/L,35-70nmol/L为边缘缺乏,<35nmol/L为缺乏;3)尿硫胺素排泄量:>100μg/24h为充足,50-100μg/24h为临界,<50μg/24h为缺乏。在食品检测中,强化食品的维生素B1含量应符合GB 14880-2012《食品营养强化剂使用标准》的要求。结果解释需结合临床状况:如酒精中毒患者即使检测值在正常低限也可能存在功能缺乏;而肾病患者排泄量标准需单独评估。检测报告应注明检测方法、参考范围和影响因素说明。
证书编号:241520345370
证书编号:CNAS L22006
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